系膜增殖性腎小球腎炎動(dòng)物模型【疾病動(dòng)物外包】

【造模機(jī)制】綜合應(yīng)用葡萄球菌腸毒素 B.牛血清白蛋自及弗氏佐劑等外源性抗原進(jìn)入機(jī)體,主動(dòng)引起胃腸道黏膜免疫,可誘發(fā)出以系膜增殖為主要病理改變的腎病模型。

【造模方法】

1.動(dòng)物、菌毒素和試劑選用封閉群健康雄性 SD 大鼠,體重(240±16.5)g,隨機(jī)分組。造模用葡萄球菌腸毒素 B(SEB),解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物研究所生產(chǎn)。牛血清白蛋白(BSA),上海長(zhǎng)陽(yáng)生化制藥廠生產(chǎn)。大腸桿菌內(nèi)毒素,衛(wèi)生部上海生物制品研究所生產(chǎn)。弗氏完全佐劑及弗氏不完全佐劑,華西醫(yī)科大學(xué)免疫教研室提供。

2.模型制備實(shí)驗(yàn)第 1 天起,以 BSA 20mg(配成水溶液)隔日灌胃 1 次,共 8周,并于實(shí)驗(yàn)第 8 天和第 15 天分別從尾靜脈注射 SEB 0.4mg/kg(配成水溶液)各 1 次。同時(shí)于實(shí)驗(yàn)的第 1 天經(jīng)皮下分點(diǎn)注射弗氏完全佐劑 0.2ml(含 BSA2mg),實(shí)驗(yàn)的第 8 天經(jīng)皮下分點(diǎn)注射弗氏不完全佐劑 0.2ml(含 BSA2mg)。

3.指標(biāo)觀察實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每周做 1 次尿紅細(xì)胞鏡檢,尿蛋白定性(碘柳酸法),24 小時(shí)尿蛋白定量(碳柳酸法)。實(shí)驗(yàn)前及處死時(shí)分別檢測(cè)血清尿素氮,肌酐,總膽固醇,總蛋白及循環(huán)免疫復(fù)合物。腎臟標(biāo)本用 HE、PAS.PASM 及 Masson 四種方法分別染色,光鏡觀察腎小球的病理變化。同時(shí)每組隨機(jī)選擇 100 個(gè)腎小球進(jìn)行腎小球細(xì)胞計(jì)數(shù)(不包括球囊壁層上皮細(xì)胞),做定量分析。并用電鏡觀察腎臟的超微結(jié)構(gòu)變化。

【模型特點(diǎn)】

1.系膜細(xì)胞增生明顯自實(shí)驗(yàn)的第 6 周末大鼠腎小球出現(xiàn)系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增生;部分腎小球與球囊壁層發(fā)生粘連,至第 8 周末呈現(xiàn)明顯的系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增生。

2.造模時(shí)間較短 6～8 周即可復(fù)制成功,較單純使用 SEB 者需要 12 周為短。

3.伴有一定程度的血清肌酐升高,造模后血清肌酐由(56.13±7.91)μmol/L 顯著升高到(82.57±14.26)jmol/L。

【應(yīng)用范圍】研究系膜增殖型腎小球腎炎的發(fā)病機(jī)制以及胃腸道黏膜免疫在發(fā)病過(guò)程中起的作用。

【注意事項(xiàng)】

1.SEB、BSA、弗氏佐劑必須按上法復(fù)合應(yīng)用造模。

2.大鼠對(duì)大腸桿菌內(nèi)毒素的刺激不甚敏感。

【模型評(píng)估】系膜增殖性腎炎(MsPGN)是人類(lèi)原發(fā)性腎小球疾病最常見(jiàn)的病理類(lèi)型,約占整個(gè)腎臟疾病的 50%～60%,主要是 IgA 腎病。本模型綜合應(yīng)用 SEB 靜脈注射、BSA灌胃及弗氏佐劑皮下注射,在較短的時(shí)間內(nèi)建立了一種病變穩(wěn)定的大鼠系膜增殖型腎小球腎炎模型。

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