技術(shù)分享 | 基因干擾研究工具(上)
背景介紹
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指一種分子生物學(xué)上由雙鏈RNA誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象,其機(jī)制是通過阻礙特定基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯來抑制基因表達(dá)。
由于RNAi具有高度的序列專一性,可以特異地沉默基因,從而獲得基因功能喪失或基因表達(dá)量的降低。

基因干擾有哪些應(yīng)用呢?
01
基因功能研究
RNAi具有高效特異性抑制基因表達(dá)的特點(diǎn),運(yùn)用病毒載體介導(dǎo)shRNA干擾可以調(diào)控基因表達(dá),進(jìn)而研究基因功能
02
信號(hào)通路研究
可以運(yùn)用該技術(shù)進(jìn)行體內(nèi)體外相關(guān)信號(hào)通路及作用機(jī)制的研究
03
構(gòu)建疾病模型
通過病毒載體介導(dǎo)shRNA干擾可構(gòu)建轉(zhuǎn)基因抑制小鼠模型
04
基因治療
RNAi被用于基因表達(dá)異常升高引起的疾病,如腫瘤和病毒感染等
05
藥物開發(fā)
利用RNAi特異性高效地抑制基因的表達(dá),獲得基因功能抑制表型,進(jìn)而大規(guī)模地篩選出基因靶點(diǎn),從而實(shí)現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)藥靶在細(xì)胞水平和動(dòng)物水平的篩選和評(píng)定。
常用的基因干擾工具及區(qū)別
常見的干擾工具包括化學(xué)合成的雙鏈小干擾RNA(siRNA)、基于載體的短發(fā)夾RNA(shRNA)。

siRNA簡(jiǎn)介
siRNA(Small interfering RNA;short interfering RNA;silencing RNA) 是化學(xué)合成的小分子,導(dǎo)致基因沉默和序列特異性RNA降解的重要中間媒介,具有特殊的結(jié)構(gòu)特征即5'端磷酸基團(tuán)和3'端羥基,其兩條鏈的3'端各有兩個(gè)堿基的游離,通過與目標(biāo)mRNA特異性互補(bǔ)結(jié)合降解mRNA。

吉滿生物可根據(jù)客戶提供的目的基因信息,設(shè)計(jì)并合成siRNA,也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,提供多種熒光標(biāo)記和化學(xué)修飾的siRNA。
吉滿生物siRNA合成服務(wù)

shRNA簡(jiǎn)介
小發(fā)卡RNA(a small hairpin RNA;short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密發(fā)卡環(huán)的RNA序列,shRNA包括兩個(gè)短反向重復(fù)序列,可以克隆至shRNA表達(dá)載體,后通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染或病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)引入細(xì)胞,在細(xì)胞中經(jīng)酶切形成siRNA,用于沉默靶基因的表達(dá)。

shRNA的特點(diǎn)
01
靶向性強(qiáng)
理論上,shRNA能夠?qū)δ繕?biāo)基因進(jìn)行特異性的抑制,而不影響其他基因的表達(dá),在基礎(chǔ)研究和臨床治療中有著廣泛的應(yīng)用前景。
02
適用范圍廣
shRNA可以用于多種類型的細(xì)胞和生物體系中,并且能夠針對(duì)多種不同的基因進(jìn)行沉默。因而使得shRNA成為了研究和治療各種疾病的重要手段。
03
操作簡(jiǎn)單
與其他基因敲除技術(shù)相比,shRNA的設(shè)計(jì)、合成和操作相對(duì)簡(jiǎn)單。通常只需要將shRNA序列克隆到質(zhì)?;虿《据d體中,然后導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)即可實(shí)現(xiàn)基因沉默效應(yīng)。
04
抑制效果持久
shRNA可以在細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)長期的基因沉默效應(yīng),其抑制效果可以持續(xù)幾天甚至數(shù)周。這種特點(diǎn)使得shRNA成為了研究和治療需要長期監(jiān)測(cè)的疾病的重要工具。
05
可視化的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率
通過與熒光蛋白如GFP共表達(dá),可以快速篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染或病毒感染陽性的目的細(xì)胞,大大提高篩選效率。
常見的shRNA干擾載體除了質(zhì)粒表達(dá)載體外,還有病毒載體,包括慢病毒載體(LV)、腺病毒載體(AV)、腺相關(guān)病毒載體(AAV)等。
吉滿生物shRNA載體構(gòu)建服務(wù)
吉滿生物擁有豐富的載體構(gòu)建經(jīng)驗(yàn),有普通載體和病毒載體可供選擇。吉滿生物可為科研人員提供編碼基因以及非編碼基因(circRNA,lncRNA和microRNA)的干擾服務(wù)。
01
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
高效的載體構(gòu)建策略、優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格、測(cè)序驗(yàn)證100%正確
02
服務(wù)流程

除了提供以上常見的基因干擾工具外
吉滿還能提供一系列基因干擾相關(guān)的特色服務(wù)
因篇幅有限
特色服務(wù)內(nèi)容將在下篇詳細(xì)介紹
敬請(qǐng)關(guān)注!

吉滿生物科技(上海)有限公司成立于2011年,是專業(yè)從事生物科技前沿技術(shù)研發(fā)的高新技術(shù)企業(yè)。以病毒包裝為基礎(chǔ),密切關(guān)注行業(yè)最前沿的科研進(jìn)展,十二年深耕細(xì)作,創(chuàng)建了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、慢病毒、腺相關(guān)病毒、報(bào)告基因、抗體表達(dá)六大技術(shù)平臺(tái)。
2020年成立了專業(yè)細(xì)胞系子品牌DDXCELL,提供報(bào)告基因檢測(cè)、病毒包裝、工程細(xì)胞株構(gòu)建,基因編輯及藥物篩選評(píng)價(jià)等技術(shù)服務(wù)及相關(guān)產(chǎn)品。
2022年載體品牌“載體通·Genovector”煥新升級(jí),同時(shí)推出全新試劑品牌“優(yōu)試劑·Genoagent”,貫穿科研始末。
吉滿可為客戶提供幾千種的現(xiàn)貨載體和一站式定制服務(wù)。