DNA甲基化檢測丨你的甲基化DNA檢測怎么做的?
關于DNA甲基化檢測,有很多有趣有意思的資料,那么接下來就聊一聊DNA甲基化檢測吧~
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DNA甲基化檢測是什么意思呢?它是指利用各種方法對腫瘤細胞DNA甲基化程度進行測定。在惡性腫瘤的發(fā)展中,甲基化的狀態(tài)并不是一成不變,腫瘤細胞內(nèi)全基因組的低甲基化程度與疾病進展、腫瘤大小和惡性程度都有密切的關系,DNA甲基化檢測對腫瘤惡性程度的判斷有重要意義。
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所以DNA甲基化檢測的臨床意義,簡言之就是可用于腫瘤的預測。
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如何定量檢測某DNA的甲基化水平呢?
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1、DNA 5mC甲基化水平檢測
以DNA甲基化5mC定量檢測試劑盒(P-1026)為例,利用抗體結合和ELISA原理方式,定量分析DNA中5-mc。它可以直接檢測哺乳動物,植物,真菌細菌,病毒,細胞,組織,血清/血漿以及其它體液中的總DNA樣本的5-mc的甲基化程度。

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2、DNA 5hmC甲基化水平檢測
以BisulPlus Loci 5mC & 5hmC Detection PCR Kit(P-1067)為例,可鑒定并檢測5hmC和5mC。此試劑盒操作簡便,只需三步:
步:重亞硫酸鹽轉化待測DNA,未甲基化C轉化為U,PCR擴增后轉化為T,5mC不變,5hmC被轉化為5-亞甲基磺酸胞嘧啶(CMS)
第二步:?APOBEC脫氨酶催化亞硫酸鹽轉化后的DNA,將5mC轉化為T,而CMS不變,PCR擴增后仍為C。

第三步:通過qPCR分析比較處理和未處理的DNA序列,實現(xiàn)對DNA 5mC&5hmC甲基化的定量和定位檢測。

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關于DNA甲基化檢測,就介紹DNA 5mC甲基化水平檢測和DNA 5hmC甲基化水平檢測以上兩種啦,歡迎討論并提出意見~
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