甲基轉(zhuǎn)移酶作為藥物靶標

甲基轉(zhuǎn)移酶是一個多樣化的酶家族，可催化甲基從S-腺苷甲硫氨酸（SAM或AdoMet）轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）作為副產(chǎn)物。甲基轉(zhuǎn)移酶與多種疾病有關(guān)，包括癌癥、炎癥性疾病、代謝性疾病和神經(jīng)退行性疾病（Copeland等人，2009）。

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表觀遺傳調(diào)控已被證明是多種疾病的促成因素。甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)目前是一個活躍的領(lǐng)域。繼續(xù)建立對甲基轉(zhuǎn)移酶的理解是第一步。尋找控制過度活動的治療方法需要選擇性技術(shù)，以幫助評估與目標相互作用的能力。穩(wěn)定、適用于?HTS?的檢測試劑盒準確而靈活，是加速發(fā)現(xiàn)的強大工具。

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AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒可直接測量甲基化過程中甲基轉(zhuǎn)移酶產(chǎn)生的SAH。這些酶使用S-腺苷甲硫氨酸（SAM）作為甲基供體將多種底物甲基化，留下共同產(chǎn)物S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）。這些SAH測量使研究人員能夠有效地確定甲基轉(zhuǎn)移酶的活性。該測定提供了一種強大的工具來篩選甲基轉(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)劑的化合物庫，以幫助尋找疾病的新療法。該試劑盒配有測量活性所需的檢測試劑。甲基轉(zhuǎn)移酶不包括在抑制劑篩選測定試劑盒中。

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艾美捷AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒#BBK-3023-B與各種MTase受體底物兼容，穩(wěn)健的檢測可產(chǎn)生高質(zhì)量的數(shù)據(jù)：

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圖1：耐受?MT?受體底物。在核小體（100 ng/μL）、組蛋白H10-3（3 ng/μL）、組蛋白H3-3（1-21）肽（10?μM）和聚d（I-C）（2.5 mU/μL）存在下建立<> nM SAH-SAM標準曲線;對照井缺乏MT底物。

圖2：PRMT4酶與0.2 uM或2 uM SAM和組蛋白底物作為陽性對照。PRMT4和組蛋白底物作為陰性對照。

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AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒包含的內(nèi)容：

SAM?：SAM supplied in the kit should be used for MT enzyme reactions and to create a SAM/SAH standard curve.

SAH：SAH is used to create a SAM/SAH standard curve.

Enzyme Stop Reagent, 10X：Enzyme Stop Reagent is diluted to 1x in SAH Detection Buffer and used to quench the activity of MT enzyme components.

SAH Detection Buffer, 10X：This buffer is used to prepare the SAH Detection Mix and the Enzyme Stop Mix

P1-Biotin：P1-Biotin is a 55-base RNA oligomer with a biotin molecule at the 5' end. It is incubated with TB-Streptavidin to produce P1-Terbium, the donor piece of the SAH aptamer.

P2-Dylight 650：?P2-Dylight 650 is an 18-base RNA oligomer with a Dylight 650 molecule at the 3' end. It is the acceptor piece of the SAH aptamer.

Tb-Streptavidin：Tb-Streptavidin is used to produce the Tb-labeled (donor) piece of the SAH aptamer.

Conjugation Buffer：This buffer is used for the P1-Biotin/Tb-Streptavidin conjugation reaction.