Lumiprobe抗體標(biāo)記試劑盒用于制備每個(gè)抗體具有2.5-3個(gè)標(biāo)簽的標(biāo)記抗體。試劑盒包含用于10個(gè)標(biāo)記反應(yīng)的所有試劑和材料，每個(gè)反應(yīng)100 ug抗體。染料是一種NHS酯，過量服用。在弱堿性pH下，它與抗體的賴氨酸胺基反應(yīng)?？贵w的純化通過使用旋轉(zhuǎn)柱的凝膠過濾實(shí)現(xiàn)。這些試劑盒含有磺化水溶性染料，最適合標(biāo)記敏感蛋白質(zhì)，包括抗體。

?

Lumiprobe

Lumiprobe?專業(yè)提供分子生物學(xué)研究用的活性熒光染料。覆蓋領(lǐng)域有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreen I染料，定制合成熒光雙標(biāo)記引物。主要應(yīng)用：點(diǎn)擊化學(xué)（CLickChemistry）、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的雙向熒光差異凝膠電泳（2DDIGE）和實(shí)時(shí)熒光定量PCR（ReaLtimePCR）。

?

接下來給大家介紹一下Lumiprobe?/艾美捷 抗體標(biāo)記試劑盒的相關(guān)內(nèi)容：

?

1.抗體制備

標(biāo)記反應(yīng)的最佳條件如下：濃度為1 mg/mL的抗體溶解在0.1 M碳酸氫鈉溶液中。疊氮化鈉與標(biāo)簽相容。如果抗體濃度低于1 mg/mL，則應(yīng)進(jìn)行濃縮?？贵w制備應(yīng)不含氨基酸、蛋白質(zhì)（如BSA）和緩沖成分，這些成分會(huì)使pH值處于不利（2-7.5或9-12）范圍。

?

2.建立反應(yīng)

2.1.?向熒光團(tuán)、旋渦中添加碳酸氫鈉抗體溶液（100微克/100微升*），并在室溫下培養(yǎng)30分鐘。

*如果要標(biāo)記少量抗體，將凍干染料溶解在10微升無水二甲基亞砜中，每10微克抗體取1微升溶液。應(yīng)立即消耗DMSO中的染料溶液。

?

3.標(biāo)記抗體的純化

3.1.?準(zhǔn)備專欄。使用前，色譜柱應(yīng)在室溫下。應(yīng)使用漩渦重新懸浮凝膠。將色譜柱放入廢物容器（無蓋），并在1000 g下離心2分鐘（必須小心控制速度-對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)6 cm轉(zhuǎn)子，1000 g=3800 rpm）。立柱的小凸起應(yīng)朝外。

3.2.?應(yīng)用400微升1x PBS緩沖液，以1000 g離心2分鐘。

3.3.?從廢物容器上拆下柱。將其放入收集管（帶蓋）。將100微升反應(yīng)混合物施加到柱上，培養(yǎng)1分鐘，并通過離心以1000 g的速度洗脫抗體2分鐘。添加1/100體積的100倍疊氮化鈉?？贵w可以等分以提高其保存期。當(dāng)前等分試樣可儲(chǔ)存在+4°С的溫度下，其余等分試樣可儲(chǔ)存在+4°С的溫度下?20?°С.

?

4.染料與抗體比率的測量

為了計(jì)算染料與抗體的比率，測量共軛物的吸收光譜，或在280 nm（AAB）和染料吸收最大值（ADye）處的吸收。染料標(biāo)記抗體的典型吸收光譜如下所示。根據(jù)染料的不同，最大波長可能會(huì)有所不同。

?

Lumiprobe?部分研究工具：

cat#?名稱 規(guī)格

11030 Cy3 azide 100ul

12030 Cy3.5 azide 100ul

13030 Cy5 azide 100ul

14030 Cy5.5 azide 100ul

14130 FAM azide,5-isomer, 100ul

11130 JOE azide,5-isomer 100ul

14230 R110 azide,5-isomer 100ul

12230 ROX azide,6-isomer 100ul

17130 TAMRA azide, 5-isomer 100ul

33720 Azidobutyric acid NHS ester 100ul

?

艾美捷科技是Lumiprobe?的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。