艾美捷?Enzo?CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒?2.0：一種用于監(jiān)測活細胞自噬的更明亮、更耐光、無轉(zhuǎn)染的定量檢測方法。

?

CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒?2.0?使用一種選擇性標記積累的自噬泡的新型染料測量自噬泡并監(jiān)測溶酶體抑制的活細胞中的自噬通量。該染料已通過識別可滴定功能部分進行了優(yōu)化，該部分允許對溶酶體進行最小染色，同時在摻入前自噬體、自噬體和自噬溶酶體（自噬溶酶體）時表現(xiàn)出明亮的熒光。該測定提供了一種快速和定量的方法來監(jiān)測活細胞中的自噬，而無需細胞轉(zhuǎn)染。

?

艾美捷?Enzo?CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒組分：

CYTO-ID ? Green Detection Reagent 2

Hoechst 33342?核染色

自噬誘導劑（雷帕霉素）

氯喹對照

10X?檢測緩沖液

?

艾美捷?Enzo?CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒特點：

1.沒有轉(zhuǎn)染試驗消除了轉(zhuǎn)染效率驗證的需要

2.更亮、更耐光的染料可特異性染色自噬囊泡

3.溶酶體的可忽略不計的染色降低了其他染料的背景

4.快速量化天然異質(zhì)細胞群中的自噬

5.促進自噬激活劑和抑制劑的高通量篩選

?

艾美捷?Enzo?CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒作用機制：

該探針是一種陽離子兩親示蹤劑?(CAT)?染料，它以與誘導磷脂沉積的藥物類似的方式快速分配到細胞中。仔細選擇染料上的可滴定功能部分可防止其在溶酶體內(nèi)積聚，但可以標記與自噬途徑相關(guān)的液泡。

?

艾美捷?Enzo?CYTO-ID ?自噬檢測試劑盒化學性質(zhì)：

應用：流式細胞術(shù)、熒光顯微鏡、熒光檢測、HTS

質(zhì)量控制：顯微鏡檢查：當?CYTO-ID? Green?自噬檢測試劑?2?摻入細胞中時，通常會在細胞核周區(qū)域的球形空泡中、在整個細胞質(zhì)中分布的病灶中或在這兩個位置中觀察到這種熒光探針的積累，具體取決于根據(jù)正在研究的細胞類型。與按照用戶手冊所述制備的自噬樣品相比，未誘導的細胞顯示出非常低的背景染色。

數(shù)量：對于?-0200?尺寸：

200?次流式細胞儀檢測、250?次顯微鏡檢測或?3 x 96?孔微孔板檢測。

-0050?尺寸：

50?次流式細胞儀檢測、60?次顯微鏡檢測或?1 x 96?孔微孔板檢測。

使用/穩(wěn)定性：通過適當?shù)拇鎯?，試劑盒組件自收到之日起可穩(wěn)定使用一年。

處理：避光。避免冷凍/解凍循環(huán)。

在藍冰上運送

短期儲存：-20°C

長期儲存：-80°C

?

?

圖：基于微孔板的?HepG2?細胞自噬分析。在?DMSO（對照）、0.5 μM?雷帕霉素?(Rap)、10 μM?氯喹?(CLQ)?或?0.5 μM Rap?和?10 μM CLQ?中培養(yǎng)?20?小時后，HepG2?細胞被?CYTO-ID? Green Detection Reagent 2?染色。細胞也用?Hoechst 33342?染色以進行細胞數(shù)標準化。用?CYTO-ID? Green Detection Reagent 2?測量，用雷帕霉素和氯喹處理的細胞自噬增加。

?

文獻參考：

1.Air Plasma-Activated Medium Evokes a Death-Associated Perinuclear Mitochondrial Clustering: M. Suzuki-Karasaki, et al.; Int. J. Mol. Sci. 23, 1124 (2022), Abstract;

2.Cellular Effects of Cyclodextrins: Studies on HeLa Cells: á. Rusznyák, et al.; Molecules 27, 1589 (2022), Abstract;

3.CNS serotonin content mediating food deprivation-enhanced learning is regulated by hemolymph tryptophan concentration and autophagic flux in the pond snail: Y. Totani, et al.; Nutr. Neurosci. (2022), Abstract;

?

Abnova現(xiàn)有抗體數(shù)量100000多種，蛋白近25000多種，其通過基因組學手段生產(chǎn)出的幾萬種重組蛋白和抗體，J大的擴展了生物試劑應用的視野和多樣性。艾美捷科技是Abnova的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。