MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。

?

艾美捷MTT細(xì)胞增殖檢測試劑盒測定原理：

Cell Biolabs艾美捷MTT細(xì)胞增殖檢測試劑盒含有足夠的試劑用于評估在96孔板中進(jìn)行960次測定或在24孔板中進(jìn)行192次測定。細(xì)胞可以被鍍，然后用影響增殖的化合物或藥劑。然后用增殖試劑檢測細(xì)胞，在活細(xì)胞中由黃色四唑MTT轉(zhuǎn)化為紫色福爾馬贊形式細(xì)胞還原酶。細(xì)胞增殖的增加伴隨著信號的增加，雖然細(xì)胞增殖（和信號）的減少可以表明化合物的毒性作用或次優(yōu)的培養(yǎng)條件。

?

該測定原理是基本的，可應(yīng)用于大多數(shù)真核生物細(xì)胞系，包括貼壁和非貼壁細(xì)胞以及某些組織。這種細(xì)胞增殖試劑可用于檢測細(xì)菌，酵母，真菌，原生動物以及培養(yǎng)的哺乳動物中的增殖和魚細(xì)胞。

?

艾美捷MTT細(xì)胞增殖檢測試劑盒相關(guān)參數(shù)：

全稱：CytoSelect MTT細(xì)胞增殖分析試劑盒

英文：CytoSelect MTT Cell Proliferation Assay

編號：CBA-252

規(guī)格：960assays

存儲：MTT細(xì)胞增殖測定試劑是一種透明的黃色即用溶液儲存于-20°C，避光。在室溫下儲存洗滌劑溶液。如果沉淀或在洗滌劑溶液中觀察到渾濁，將溶液加熱至37°C 10–20分鐘使用前攪拌以溶解沉淀物。

?

套件組件

1.MTT細(xì)胞增殖測定試劑（部件號125201）：一瓶10mL MTT試劑。

2.洗滌劑溶液（部件號125202）：一瓶100毫升洗滌劑溶液

?

艾美捷MTT細(xì)胞增殖檢測試劑盒測定方案：

1.制備含有0.1-1.0 x 106的細(xì)胞懸液培養(yǎng)基中的細(xì)胞/ml。

2.將每孔100μL加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板或每孔500μL加入24孔細(xì)胞培養(yǎng)物中有或沒有待測化合物的板。細(xì)胞在37°C和5%培養(yǎng)24-96小時(shí)加濕培養(yǎng)箱中的二氧化碳。

3.加入10μlCytoSelect??MTT細(xì)胞增殖測定試劑，如果使用96-孔板，或24孔板的每個(gè)孔50μL。

4.在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小時(shí)，直至可見紫色沉淀（細(xì)胞在光學(xué)顯微鏡下可以更精確地觀察到沉淀物）

5.在96孔板的每孔中加入100μL去污劑溶液，或在24孔板的每孔中加入500μL去污劑溶液盤子。

6.在室溫下孵育2小時(shí)至避光過夜。

注意：在井中與洗滌劑溶液長時(shí)間孵育可能導(dǎo)致沉淀或渾濁可以增加背景。如果觀察到沉淀，將板在37℃加熱10-20分鐘并攪拌溶解沉淀物。

7.使用540-570nm作為主波長讀取吸光度。

?

MTT細(xì)胞增殖檢測試劑盒部分引用文獻(xiàn)：

1. Housein, Z. et al. (2021). In vitro anticancer activity of hydrogen sulfide and nitric oxide alongside?nickel nanoparticle and novel mutations in their genes in CRC patients. Sci Rep. 11(1):2536. doi:10.1038/s41598-021-82244-x.

2. Yoshiya, S. et al. (2020). Impact of Capicua on Pancreatic Cancer Progression. Ann Surg Oncol.?doi: 10.1245/s10434-020-09339-z.

3. Zhou, K.I. et al. (2019). Regulation of Co-transcriptional Pre-mRNA Splicing by m6A through the

Low-Complexity Protein hnRNPG. Mol Cell. pii: S1097-2765(19)30535-0. doi:10.1016/j.molcel.2019.07.005.