?熒光染料可對(duì)蛋白質(zhì)、核酸和聚糖等其他結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色，即便鈣離子等非生物物質(zhì)也可以檢測(cè)出來。利用熒光物質(zhì)與相應(yīng)抗體或抗原發(fā)生特異性結(jié)合后，可對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定位、定性和定量的分析，此方法具有高度特異性、敏感性和直觀性，是最早出現(xiàn)的免疫標(biāo)記技術(shù)。

當(dāng)熒光物質(zhì)吸收激發(fā)光的能量后，電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，當(dāng)其回復(fù)至基態(tài)時(shí)，以發(fā)射光形式釋放出能量，稱為熒光。其特點(diǎn)為在接受能量后即可引起發(fā)光，而一旦停止供能后，熒光隨之瞬間消失。

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熒光素是最常見的熒光染料之一。與強(qiáng)堿反應(yīng)生成熒光素鹽，易溶于水，并有強(qiáng)烈綠色熒光，熒光量子產(chǎn)率0.65（pH=7水溶液）?？墒乖S多生物具有熒光的物質(zhì)。它與ATP形成復(fù)合物（熒光素腺苷），然后再與熒光素酶(Luciferase)結(jié)合。

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FITC:異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機(jī)熒光染料，發(fā)射波長為520 nm的熒光染料，是目前最常用的熒光標(biāo)志物；它的激發(fā)波長接近488 nm，光量子得率高，但受pH影響較大。目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。

在 495/517 nm 處，該染料會(huì)產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值，并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合，該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分—— 熒光素，其摩爾質(zhì)量為 332 g/mol，常被用作熒光示蹤劑。FITC(389 g/mol) 是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料，且其被當(dāng)成 Alexa Fluor?488 等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng)，而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。

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TRITC:四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸(TRITC) 是經(jīng)常與 FITC 同時(shí)使用的另一種染料，由最大波長為 550nm的綠色光譜中的光所激發(fā)，其最大發(fā)射波長為 573 nm。TRITC (479 g/mol) 并非熒光素，而是羅丹明家族的衍生物，羅丹明也具有一個(gè)大的共軛芳香電子系統(tǒng)，正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。

雖然 FITC 和 TRITC 仍在使用，但由于它們屬于發(fā)光相對(duì)較弱的熒光染料且它們的優(yōu)勢(shì)僅僅是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，因此，在最新的顯微鏡技術(shù)中并不推薦。

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相關(guān)產(chǎn)品：

5-Carboxy Fluorescein

5-FAM ?5-羧基熒光素 ?76823-03-5

6-Carboxy Fluorescein

6-FAM ?6-羧基熒光素 3301-79-9

5(6)Carboxy fluorescein

5(6)-FAM ?5(6)羧基熒光素 72088-94-9

5(6)-FAM,SE

5(6)Carboxy fluorescein-NHS ester

5(6)-FAM-NHS ester ?117548-22-8

5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester

5-FAM,SE ;5-Carboxyfluorescein-NHS ester

92557-80-7

6-Carboxyfluorescein succinimidyl ester

6-FAM,SE ;6-Carboxyfluorescein-NHS ester

92557-81-8

5(6)-FITC

5(6)-Fluorescein ?27072-45-3

5-FITC,5-Fluorescein ?3326-32-7

6-FITC,6-Fluorescein ?3326-31-6

5(6)-Carboxy tetramethyl rhodamine

5(6)-TAMRA

5(6)羧甲基羅丹明 ?150347-56-1

5-Carboxytetramethylrhodamine

5-TAMRA，5-羧甲基羅丹明 ???91809-66-4

6-Carboxytetramethylrhodamine

6-TAMRA

6-羧甲基羅丹明 ??91809-67-5

5(6)-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester

5(6)-TAMRA-NHS ester 246256-50-8

5-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester

5-TAMRA-NHS ester

5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯

5-TAMRA,SE 150810-68-7

6-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester

6-TAMRA-NHS ester

6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯

6-TAMRA,SE ?150810-69-8

小編YQ2020.12