FerroOrange是一種橙色熒光探針，專門檢測不穩(wěn)定的鐵（II）離子（Fe2 +）。在鐵（III）離子（Fe3 +）或鐵以外的二價金屬離子存在下，熒光強度不會增加。它也不會對鐵蛋白和其他物質中的螯合鐵反應。橙色鐵適用于活細胞成像，因為它具有高細胞滲透性并且具有低細胞毒性。

圖1 0.05 M HEPES緩沖液（pH）中FerroOrange的吸收光譜和熒光光譜

在542nm處觀察到吸收最大值，熒光最大值為在572nm處觀察到。

試劑的制備

■ 所需的材料

?二甲基亞砜

?適當的洗滌和觀察緩沖液（PBS pH 7.4、HBSS等）。它應該是一種不含酚紅的溶液。

試劑的制備

1. FerroOrange是一種無色粉末。將小瓶恢復到室溫，注意不要吸收水分，將其放入微量離心機中，收集粘附在蓋子和底部壁上的粉末，然后打開小瓶。

2. 向 1 個小瓶（35 nmol）中加入 35 μL DMSO，并重復移液 5 次或更多次以完全溶解試劑。得到的溶液是1mM。FerroOrange溶液幾乎是無色的。使用中性緩沖液或用于稀釋DMSO溶液的培養(yǎng)基，并在稀釋后立即使用。FerroOrange可以在酸性溶液中被氧化。