SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量
SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)測(cè)定蛋白質(zhì)分子量,簡(jiǎn)便、快速且重復(fù)性好,是一種常用的蛋白質(zhì)分子量測(cè)定方法。百泰派克生物科技提供基于SDS-PAGE或質(zhì)譜的蛋白質(zhì)分子量測(cè)定服務(wù)。
SDS-PAGE
SDS-PAGE即十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳,是一種間斷的電泳系統(tǒng),通常用于分離分子量在5—250kDa之間的蛋白質(zhì)。十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝膠(polyacrylamide gel ,PAG)組合使用可以消除結(jié)構(gòu)和電荷的影響,從而僅根據(jù)分子量的差異來分離蛋白質(zhì)。

SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量
蛋白質(zhì)分子量即蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量,是蛋白質(zhì)化學(xué)式中各個(gè)原子的相對(duì)原子質(zhì)量的和。蛋白質(zhì)分子量正確與否往往預(yù)示著蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能正確與否。測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的方法有很多,SDS-PAGE是主要方法之一,也是實(shí)驗(yàn)室使用最普遍的一種。在SDS-PAGE中,已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)和未知樣品同時(shí)電泳。染色后,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的相對(duì)遷移率和分子量的對(duì)數(shù),可得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,利用未知樣品的相對(duì)遷移率可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其分子量。另外,SDS-PAGE法可分為還原電泳和非還原電泳,還原電泳中蛋白質(zhì)二硫鍵被還原使得蛋白質(zhì)可以充分伸展,因此使測(cè)定結(jié)果更為準(zhǔn)確。