當(dāng)您用含血清體系培養(yǎng)出的類器官篩選藥物，數(shù)據(jù)不可重復(fù)卻苦于找不到原因該怎么辦？

當(dāng)您用含血清體系培養(yǎng)出的類器官基因過表達(dá)之后，陽性結(jié)果遲遲看不到，可曾想過是什么原因？

當(dāng)您的paper因為培養(yǎng)體系中的血清干擾實驗數(shù)據(jù)結(jié)果，被審稿人返稿要求返修，實驗無法重復(fù)時該怎么辦？

類器官培養(yǎng)——血清之坑

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛應(yīng)用的添加物，含有豐富的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。但血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的好伙伴，卻是類器官培養(yǎng)中的一大噩夢。

盡管胎牛血清已被廣泛使用，但血清的確切成分仍不清楚，并可能導(dǎo)致類器官生長不一致。?動物來源的血清存在異質(zhì)性，令人擔(dān)憂的是，胎牛血清對類器官培養(yǎng)和表型具有顯著且未知的影響。

Seino 等發(fā)現(xiàn)，含有胎牛血清的條件培養(yǎng)基無法長時間維持胰腺癌類器官生長，額外的血清加入會加速類器官的衰老，進(jìn)一步影響基于類器官的實驗。

總之血清的成分很復(fù)雜，包括各種促生長、分化的因子和激素等，其濃度和組成都是未知的。而類器官培養(yǎng)過程中需要嚴(yán)格控制其生長的信號通路，血清中豐富的營養(yǎng)因子可能在短期有促生長的作用，但其中一些未知的成分會對信號調(diào)控造成很大的干擾，甚至?xí)绊戭惼鞴偕L的命運，譬如培養(yǎng)多代后因細(xì)胞分化，使得類器官失去生長能力，這在有血清的體系中非常常間見。

不用含血清的培養(yǎng)基，那我該怎么辦?

1.購買因子自配試劑可行嗎？

目前類器官培養(yǎng)的針對于類器官優(yōu)化過的因子比較稀缺，而且單價比較高，幾十種試劑搭配，科研自用無標(biāo)準(zhǔn)（Nature Protocol 部分配方還有隱藏），而且人工配制批次效應(yīng)，實驗重復(fù)性差。建議還是選用高品質(zhì)、無血清、做過類器官培養(yǎng)測試的類器官培養(yǎng)試劑盒來幫助您節(jié)約時間和金錢成本，快速推動類器官培養(yǎng)進(jìn)程。

2.那使用條件培養(yǎng)基呢？

依據(jù)Hans Clevers實驗室早期發(fā)表的文章，可以采用條件性培養(yǎng)基代替純化的細(xì)胞因子進(jìn)行類器官培養(yǎng)，但是還是有以下問題沒有辦法解決：

01、細(xì)胞因子含量和活性檢測：含有多種蛋白質(zhì)，不易檢測且每批次都要重新進(jìn)行檢測。

02、純度：含有大量細(xì)胞代謝產(chǎn)物，純度較低，在條件培養(yǎng)基中包含動物來源的血清也可能導(dǎo)致類器官建模的非標(biāo)準(zhǔn)化。

03、儲存：由于條件性培養(yǎng)基是液體因此不論是短期冷藏保存，還是長期凍存，都會降低細(xì)胞因子活性。
04、內(nèi)毒素：通常沒有去除內(nèi)毒素的步驟。
05、批間一致性：不能完全控制培養(yǎng)條件，批間一致性較差。

總之：條件培養(yǎng)基的成分存在批次間差異并且包含未知的額外因素，這些因素可能對類器官表型的影響不明確，這可能會影響實驗的可重復(fù)性。因此，選用高品質(zhì)的商品化無血清類器官培養(yǎng)試劑盒能夠幫您節(jié)約時間和金錢成本。

3.可我用含血清的培養(yǎng)基養(yǎng)的類器官也長挺好的呀？

類器官的培養(yǎng)終極目的不是為了養(yǎng)好，是為了獲得標(biāo)準(zhǔn)的模型，更好的開展科學(xué)實驗，血清成分復(fù)雜存在許多未知因素，有時候會干擾實驗結(jié)果，掩蓋培養(yǎng)細(xì)胞的生理功能，不容易發(fā)現(xiàn)一些調(diào)控變化導(dǎo)致類器官的研究結(jié)果不穩(wěn)定甚至獲得相反的結(jié)果。

4.腫瘤類器官能否用正常類器官的試劑盒培養(yǎng)？

因為目前國內(nèi)外腫瘤類器官試劑盒很少，多為正常組織的試劑盒，所以有些廠家會推薦用正常類器官試劑盒培養(yǎng)對應(yīng)腫瘤類器官，這是不符合類器官培養(yǎng)邏輯的，類器官培養(yǎng)基本質(zhì)是還原對應(yīng)組織在體內(nèi)的微環(huán)境，不同的組織，正常組織和腫瘤組織對應(yīng)的微環(huán)境顯然是不一樣的，特別是因為某些腫瘤的基因突變，其微環(huán)境相對正常組織甚至是截然相反的，用同一套試劑培養(yǎng)正常和腫瘤類器官顯然是不可取的。

那我該用什么培養(yǎng)基？

伯楨無血清類器官試劑盒 您的最佳選擇

1.?全工程化、穩(wěn)株生產(chǎn)因子替代血清

2.更穩(wěn)定效期長達(dá)1年

3.不同組織、不同癌種、不同亞型專屬培養(yǎng)基

基礎(chǔ)扎實：自主生產(chǎn)的培養(yǎng)因子，均做過工程優(yōu)化，穩(wěn)株生產(chǎn)，品質(zhì)可靠。

體系優(yōu)異：，成功率高（總體80%以上，個別95%以上），擴(kuò)增，傳代穩(wěn)定。

品質(zhì)精良：每批產(chǎn)品都嚴(yán)格經(jīng)過類器官培養(yǎng)測試，批次之間無差別，超高生物活性。

功能強(qiáng)大：細(xì)胞起始量要求低，高建成率（可以適用于：手術(shù)，活檢，鏡檢，惡性積液樣本。）

操作簡單：A、B、C三個組分混合，免去繁雜配液過程。

類器官試劑盒注意事項

1. 收到產(chǎn)品，請及時確認(rèn)試劑盒A液是否2~8°C運輸，B、C液是否干冰運輸。

2. 產(chǎn)品分裝：建議按配置10mL或者20mL完全培養(yǎng)基進(jìn)行分裝。

A液2~8°C保存無需分裝，在冰上解凍B、C并充分混勻。按照配置完全培養(yǎng)基（10mL或20mL）所需的量分裝B、C，分裝后保存在-20°C，從而避免反復(fù)凍融。

3. 完全培養(yǎng)基配置（10ml為例）：

????按A：B：C（：D）=1：50：250比例配置。

????例：? ?A：B：C（：D）=9.76mL：200μL：40μL

4. 完全培養(yǎng)基保存：完全培養(yǎng)基配置后請立即使用，保存在2~8°C，兩周之內(nèi)用完。

部分產(chǎn)品含有D液，使用前請詳細(xì)閱讀說明書，此公眾號僅供參考。

伯楨生物成立于2021年3月，2022年9月完成集團(tuán)重組，總部立足蘇州工業(yè)園區(qū)。致力提供類器官標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品和一體化技術(shù)服務(wù)，覆蓋基礎(chǔ)研究、精準(zhǔn)醫(yī)療、藥物研發(fā)三大細(xì)分應(yīng)用場景。公司創(chuàng)始團(tuán)隊深耕類器官行業(yè)底層技術(shù)創(chuàng)新，先后搭建全球首例人源類器官新冠感染模型、母細(xì)胞瘤發(fā)生模型等多疾病模型與新藥研發(fā)平臺，國際首臺首制類器官全自動建庫與高通量藥物發(fā)現(xiàn)平臺，及基于組織及腫瘤微環(huán)境解析的創(chuàng)新類器官模型構(gòu)建平臺。擁有覆蓋多譜系、多癌種類器官的全鏈條試劑、試劑盒產(chǎn)品，及全流程CDMO、CRO技術(shù)服務(wù)。伯楨生物秉承“引領(lǐng)醫(yī)藥創(chuàng)新，共享模型價值”的愿景，以國際一流的研發(fā)科技人才為核心，以“全球領(lǐng)先類器官模型平臺”為使命，堅持優(yōu)質(zhì)和高效的服務(wù)，切實提升客戶新藥研發(fā)效率和基礎(chǔ)研究能力，讓好藥更早惠及大眾。