近期CDE批準(zhǔn)了安徽中盛溯源生物科技有限公司的NCR300注射液，開展臨床實驗的申請，這也是我國首個獲批臨床的誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（Induced pluripotent stem cell，iPSC）來源的自然殺傷細(xì)胞療法。iPSC與胚胎干細(xì)胞擁有相似的再生能力，理論上可以分化為成體的所有器官、組織，同時可以規(guī)避倫理道德爭議和排異反應(yīng)。iPSC技術(shù)飛速發(fā)展的起點是2006年，日本科學(xué)家山中伸彌創(chuàng)造性的使用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體將4個轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入小鼠成纖維細(xì)胞中，將其重編程為具有人胚干細(xì)胞特性的多能性細(xì)胞。在這十幾年間iPSC已經(jīng)覆蓋了疾病研究、藥物篩選、細(xì)胞治療等領(lǐng)域，在我國也迎來了其發(fā)展的快速擴張期，今天我們就來了解一下iPSC在技術(shù)和市場方面的表現(xiàn)。

首先一個新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展需要本國政策友好環(huán)境的支持，鼓勵發(fā)展的同時明確責(zé)任和法規(guī)。iPSC療法目前在我國的發(fā)展仍處于臨床探索階段，但是已經(jīng)發(fā)生了因非法使用iPSC療法而導(dǎo)致腫瘤發(fā)展的不良事件，這無疑強調(diào)了市場對標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化的細(xì)胞療法的迫切需求。我國相關(guān)機構(gòu)也在2015年頒布了《干細(xì)胞臨床研究管理規(guī)定（試行）》，以此為起點開始細(xì)胞治療產(chǎn)品的研究和生產(chǎn)進行了嚴(yán)格規(guī)范。近年來，我國政府出臺了一系列針對細(xì)胞治療的監(jiān)管法律和政策，包括《干細(xì)胞臨床試驗研究基地管理辦法（試行）》、《干細(xì)胞臨床研究管理辦法（試行）》、《人源性干細(xì)胞及其衍生細(xì)胞治療產(chǎn)品臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）》，明確了申請流程和臨床試驗要求，引導(dǎo)行業(yè)良性發(fā)展，加快了iPSC產(chǎn)品的臨床應(yīng)用和商業(yè)化進程。

一個成熟的iPSC療法，首先在前期需要關(guān)鍵的四個過程，包括體細(xì)胞分離與培養(yǎng)、介導(dǎo)載體的構(gòu)建、誘導(dǎo)因子的導(dǎo)入及細(xì)胞培養(yǎng)以及iPSC的篩選及鑒定。

Fig1：iPSC療法示意圖

iPSC的制備受多種因素影響，包括體細(xì)胞的選擇、介導(dǎo)因子和介導(dǎo)載體的選擇及優(yōu)化、后續(xù)的培養(yǎng)、篩選鑒定以及重編程效率都需要納入考慮范圍。

不同來源或不同發(fā)育程度的細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生的iPSC在效率和安全性上具有較大的差別。因此，應(yīng)選擇適合的iPSC原料細(xì)胞以滿足后續(xù)研究或治療的需求。目前，iPSC領(lǐng)域多選擇便于獲取的細(xì)胞，常用的有血細(xì)胞、尿液細(xì)胞以及皮膚成纖維細(xì)胞等。選擇介導(dǎo)因子時，應(yīng)權(quán)衡其誘導(dǎo)效率、細(xì)胞增殖能力和細(xì)胞安全性。山中伸彌教授團隊用Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4成功誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞恢復(fù)多能性狀態(tài)，但c-Myc是一種原癌基因，具有潛在成瘤風(fēng)險。Nakagawa等人嘗試去掉c-Myc ?因子，只用Oct4，Sox2和Klf4這3個轉(zhuǎn)錄因子進行iPSC誘導(dǎo)并獲得成功，證實了c-Myc不是iPSC逆轉(zhuǎn)化必需的因子。臨床的iPSC需要無飼養(yǎng)層（Ff）和無異源（Xf）培養(yǎng)條件。常見的Ff-Xf體系iPSC培養(yǎng)方法包括TeSR1、E8、StemFit、rLN511E8聯(lián)合StemFit等。在培養(yǎng)過程中，可根據(jù)需要加入RG108、丁酸鈉和trichostatin A等小分子化合物以提高重編程效率。

Fig2：iPSC定向改造

目前最新的研究方向是將CRISPR基因編輯技術(shù)的定向敲除或加入基因，糾正干細(xì)胞基因組內(nèi)的基因誤差的能力應(yīng)用到iPSC的定向編輯中，已經(jīng)在一些疾病領(lǐng)域的細(xì)胞試驗中取得階段性的實驗成果。德國學(xué)者在Curr Protoc Stem Cell Biol上發(fā)表文章表明，采用Cytena單細(xì)胞打印機分選基因編輯后的iPSC單細(xì)胞，可以大幅提高細(xì)胞存活率和單克隆效率。

根據(jù)Clinical Trials臨床試驗數(shù)據(jù)庫的檢索結(jié)果，截至2023年3月底，有關(guān)iPSC的臨床試驗有137項，今年也有6個相關(guān)試驗完成臨床注冊，涉及關(guān)節(jié)炎、移植物抗宿主病、心力衰竭、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤、呼吸衰竭、帕金森病、卒中等疾病。全球及中國在研iPSC治療產(chǎn)品衍生種類主要包括CAR-iNK、多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞、CAR-iMac、i-MSC、心肌細(xì)胞、其他神經(jīng)細(xì)胞、CAR-iT、胰島細(xì)胞等。其中，CAR-iNK是衍生最多的細(xì)胞類型，占27%。進入臨床階段的iPSC衍生細(xì)胞種類包括 i-MSC、心肌細(xì)胞、CAR-iNK、CAR-iT、多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞。龐大的臨床試驗支撐著市場發(fā)展的基礎(chǔ)，鏈接著從實驗室和市場的iPSC療法。我國作為人口大國，對于iPSC療法的需求必然是旺盛的，預(yù)計到2026年，市場規(guī)模將達到8240萬美元，預(yù)測期內(nèi)的復(fù)合年增長率（CAGR）為8.5%。資本方也對我國市場持樂觀態(tài)度，融資事件頻繁發(fā)生，幾乎覆蓋第一梯隊的研究企業(yè)。

另一方面，企業(yè)之間的聯(lián)合開發(fā)也成為一個發(fā)展趨勢，跨國之間的合作也屢見不鮮，頭部企業(yè)的BMS向Century Therapeutics就iPSC衍生的iNK和或iT產(chǎn)品，Century Therapeutics將獲得1億美元預(yù)付款和5,000 萬美元的股權(quán)投資；百濟神州也與Shoreline達成全球獨家戰(zhàn)略合作。老牌大型藥企則會選擇收購或者并購的方式，快速攜帶成熟的產(chǎn)品進入戰(zhàn)局，資本市場的火熱是國家政策和科研技術(shù)共同催生的結(jié)果。

iPSC不僅能夠為疾病的研究提供重要的實驗?zāi)Ｐ?，還可以為臨床治療提供新的途徑。iPSC可以用于生成各種類型的細(xì)胞，如神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞等，用于治療各種疾病，如神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病和代謝性疾病等。此外，iPSC還可以用于藥物篩選和安全性評價等方面。不過目前iPSC的制備和應(yīng)用還面臨著一些挑戰(zhàn)和限制，制備過程中的低效率、不確定性和安全性問題仍然需要解決。另外，iPSC的應(yīng)用還需要解決一些倫理和法律問題，如個人隱私保護、知情同意和知識產(chǎn)權(quán)等問題。但是遵循著新生事物螺旋上升的前進發(fā)展步調(diào)，iPSC行業(yè)在我國的細(xì)胞治療領(lǐng)域必將畫下濃墨重彩的一筆。

關(guān)于同立海源

北京同立海源生物科技有限公司，成立于2011年，專注細(xì)胞和基因治療（CGT）上游GMP級原料試劑研發(fā)，致力于為生命科學(xué)提供可靠的產(chǎn)品與服務(wù)。產(chǎn)品涉及細(xì)胞分選磁珠試劑，真核/原核重組蛋白、無血清培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒、轉(zhuǎn)染試劑、基因編輯工具酶等。為細(xì)胞和基因治療藥物、抗體藥物開發(fā)、細(xì)胞儲存等生物制藥和IVD領(lǐng)域提供核心原料試劑與服務(wù)。

公司建有2000㎡的研發(fā)實驗室及GMP級潔凈車間，包括真核與原核蛋白表達工程平臺、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)開發(fā)平臺、體外診斷試劑生產(chǎn)平臺，通過ISO13485和ISO9001雙認(rèn)證，部分產(chǎn)品已獲美國FDA DMF備案。