——摘 要——

使用單克隆抗體進(jìn)行腫瘤免疫治療的最新進(jìn)展極大的改變了晚期惡性腫瘤的治療策略，激發(fā)了對(duì)各種類型治療性抗體的探索熱情。雙特異性抗體（BsAbs）是包含兩種不同抗原或表位以識(shí)別結(jié)合結(jié)構(gòu)域的重組分子。隨著雙特異性抗體和多特異性抗體的新開發(fā)技術(shù)獲得監(jiān)管機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)，基于雙特異性抗體的腫瘤免疫治療在多種類型腫瘤的臨床前和臨床研究中獲得了廣泛的潛力。但同時(shí)，抗體免疫原性、腫瘤異質(zhì)性、低緩解率、治療的耐藥性、全身不良反應(yīng)等一系列挑戰(zhàn)阻礙了BsAbs的應(yīng)用。本文綜述中，研究者對(duì)BsAbs的不同作用機(jī)制和臨床進(jìn)展，并討論了克服BsAbs臨床應(yīng)用中存在挑戰(zhàn)的相關(guān)方法。

• CD3+雙特異性T細(xì)胞結(jié)合抗體在血液學(xué)惡性腫瘤中發(fā)揮作用，并將免疫細(xì)胞招募到實(shí)體瘤微環(huán)境中用于腫瘤免疫治療。該示意圖描述了BsAbs在實(shí)體瘤（A）和血液惡性腫瘤（B）中的作用機(jī)制。此外，圖（C）中顯示了抗體的部分片段以及由其構(gòu)建的衍生物格式，圖（D）中顯示的是本綜述中提到的BsAbs的各種結(jié)構(gòu)。

• 雙特異性抗體在免疫抑制腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮抗腫瘤作用。

• 在復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境中，活化的成纖維細(xì)胞通過分泌生長因子（TGF-β、VEGF等）和其他趨化因子與腫瘤細(xì)胞、各種炎癥細(xì)胞以及間質(zhì)細(xì)胞信號(hào)聯(lián)通，以提供潛在的致癌信號(hào)并與微血管相互作用，從而誘導(dǎo)致癌細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境的加速形成。BsAbs旨在阻斷相互作用機(jī)制，將“冷”免疫環(huán)境轉(zhuǎn)化為“熱”免疫環(huán)境。

盡管目前有100多種BsAbs正在癌癥治療的臨床評(píng)估中，但大多數(shù)BsAbs仍處于早期階段，只有幾種BsAbs獲得FDA批準(zhǔn)。

（說明：原綜述中匯總了在研的大量雙抗，但由于篇幅限制，且雙抗技術(shù)挑戰(zhàn)極大，成功性較低，遂用已經(jīng)獲批的雙抗/雙功能融合蛋白代替）

——針對(duì)免疫檢查點(diǎn)和共刺激因子的雙特異性抗體促進(jìn)免疫細(xì)胞功能恢復(fù)——

雙抗的機(jī)制，大體可分為三類，一類是靶向T細(xì)胞上的特異性受體和腫瘤細(xì)胞上的特異性受體，雙抗起到橋接作用，拉近T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的距離，發(fā)揮定向清除腫瘤細(xì)胞的效果。第二類是雙靶向腫瘤細(xì)胞上表達(dá)的兩種受體，減少單靶點(diǎn)耐藥的幾率。第三類是共聚焦于T細(xì)胞上的免疫檢查點(diǎn)或共刺激因子，發(fā)揮更好的激活T細(xì)胞功能的目的。本文主要就第三類雙抗進(jìn)行詳述。

阻斷兩個(gè)免疫檢查點(diǎn)的（納武利尤單抗+伊匹木單抗、度伐利尤單抗+曲美木單抗）治療思路導(dǎo)致了雙特異性抗體（PD-1/CTLA-4雙抗）的合理設(shè)計(jì)和開發(fā)，該抗體同時(shí)靶向在相同或不同細(xì)胞表面表達(dá)的兩個(gè)免疫檢查點(diǎn)。ICBs免疫療法的創(chuàng)新性成功以及在接受ICBs聯(lián)合治療的患者中觀察到的臨床獲益率提高，使雙免疫檢查點(diǎn)雙抗的研發(fā)成藥性增大。

• MGD019是一款靶向PD-1/CTLA-4雙特異性DART分子，在體外研究顯示出對(duì)PD-1/PD-L1軸的完全阻斷和CTLA-4的可調(diào)節(jié)性抑制，并且耐受性良好。此外，MGD019正在多發(fā)性晚期實(shí)體瘤領(lǐng)域進(jìn)行人體臨床研究。在劑量遞增階段，顯示出對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療通常無反應(yīng)的各種腫瘤類型的可接受的安全性和客觀反應(yīng)率（NCT03761017）。

• MEDI5752，融合抗PD-1單抗和Tremelimumab（抗CTLA-4）在DuetLab主鏈上，優(yōu)化設(shè)計(jì)了人IgG1恒定重鏈的三個(gè)氨基酸突變，以降低Fc介導(dǎo)的免疫效應(yīng)器功能。Dovedi，S.J.等人發(fā)現(xiàn)，這種工程化分子優(yōu)先定位和抑制PD-1+T細(xì)胞上的CTLA4，并迅速誘導(dǎo)PD-1的內(nèi)化和降解。結(jié)果，CTLA-4受體的親和力顯著增加并飽和，增加了臨床益處并將進(jìn)一步的危害降至最低。此外，目前首次使用MEDI5752治療晚期實(shí)體癌的人類研究顯示，有希望的部分反應(yīng)和可接受的副作用

• 與MEDI5752不同，AK104是一種抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體，具有Akeso Biology（康方生物）自主研發(fā)的4價(jià)IgG1 scfv的對(duì)稱結(jié)構(gòu)。Cadonilimab（AK104）已在中國獲批用于治療復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性宮頸癌患者，這些患者在接受含鉑化療之前失敗。

• 如今，大多數(shù)BsAb通過一個(gè)結(jié)合臂靶向TIL上表達(dá)的潛在的免疫檢查點(diǎn)，并通過另一個(gè)連接臂阻斷PD-1/PD-L1軸，以逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭。雙免疫調(diào)節(jié)劑MGD013靶向LAG-3和PD-1。兩種靶分子都在抗原刺激后的T細(xì)胞上表達(dá)?；贒ART?形式，MGD013已顯示有效抑制PD-1與PD-L1和PD-L2的結(jié)合，同時(shí)抑制LAG-3和MHC II的結(jié)合，后者通過共同作用激活T細(xì)胞。該雙特異性抗體處于臨床I期研究（NCT03219268）。類似的臨床前雙免疫調(diào)節(jié)劑包括靶向PD-L1/LAG-3的FS118和靶向PD-L1/TIM-3的LY3415244。

———總 結(jié)———

盡管雙特異性免疫調(diào)節(jié)抗體在部分人類腫瘤類型中展示出令人期待的效果，但在大多數(shù)實(shí)體瘤患者中，仍需要不斷探索。此外，數(shù)十個(gè)具有不同靶點(diǎn)的BsAb聯(lián)合用藥已在臨床前研究顯示出活性，但大多數(shù)陽性的臨床前研究結(jié)果無法在臨床上進(jìn)一步驗(yàn)證。隨著越來越多的BsAbs進(jìn)入臨床前和臨床試驗(yàn)，各種各樣的挑戰(zhàn)阻礙了BsAbs的研發(fā)進(jìn)展。BsAbs的研發(fā)技術(shù)門檻相較于單靶點(diǎn)單克隆抗體更困難。選擇最佳靶點(diǎn)組合只是第一步，其次是根據(jù)受體結(jié)構(gòu)以及疾病的生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行合理正確的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)。此外，不適當(dāng)?shù)呐R床設(shè)計(jì)和給藥方案將使患者產(chǎn)生更高的毒性，可通過優(yōu)化治療策略、劑量、時(shí)間和順序在一定程度上降低毒副反應(yīng)，提升療效。但毫無疑問的是，雙特異性免疫調(diào)節(jié)抗體將拓寬腫瘤免疫治療的應(yīng)用前景。

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