細(xì)胞房黑膠蟲污染怎么解決?
關(guān)鍵詞:細(xì)胞房污染 ? ?細(xì)胞實(shí)驗(yàn)支原體污染 ? 細(xì)胞培養(yǎng)室滅菌
細(xì)胞株是生命科學(xué)研究的重要材料,而零污染的細(xì)胞株更是獲得可靠實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的前提。
由于細(xì)胞株是在模擬體內(nèi)生理環(huán)境等的特定體外條件下進(jìn)行生長,但又缺乏機(jī)體的免疫系統(tǒng)等機(jī)制,因此細(xì)胞培養(yǎng)工作不僅需要完善的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和技術(shù)方法,成敗的關(guān)鍵還在于能否保持無菌狀態(tài)、戰(zhàn)勝多種污染源帶來的挑戰(zhàn)。

細(xì)胞株的微生物污染源一般有細(xì)菌、真菌、支原體。其中,支原體的大小為 0.1~0.3μm,相比于細(xì)菌和真菌在污染細(xì)胞培養(yǎng)物后會導(dǎo)致培養(yǎng)基變色且鏡下可以觀察到菌體,支原體在普通的光學(xué)顯微鏡下不容易被觀察到,并且可穿過絕大部分的濾膜,因其沒有細(xì)胞壁,作用于細(xì)胞壁的抗生素對它無效。
細(xì)胞株一旦感染支原體后,培養(yǎng)基通常不會有顏色變化。支原體附著在細(xì)胞株表面,通過搶奪細(xì)胞培養(yǎng)基中的養(yǎng)分實(shí)現(xiàn)增殖。在其繁殖的過程中除了消耗培養(yǎng)基中的各種養(yǎng)分,同時還會改變培養(yǎng)基中的pH值,甚至產(chǎn)生對細(xì)胞株有毒害的代謝產(chǎn)物,從而導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)的改變。因此可以看出支原體的存在會對宿主細(xì)胞的表達(dá)、功能、生長、胞內(nèi)細(xì)胞器、代謝等方面產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響,嚴(yán)重影響培養(yǎng)細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)的準(zhǔn)確度,甚至?xí)?dǎo)致細(xì)胞株死亡。

實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條下被多種支原體同時污染的情況屢見不鮮,這是一個讓大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都十分頭痛的問題。保持無菌狀態(tài),無論對于新手亦或是老手,都是一個巨大的挑戰(zhàn)。體外培養(yǎng)的細(xì)胞缺乏免疫系統(tǒng),因此,控制污染的方式是預(yù)防污染!?
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,潛在的污染途徑主要包括操作技術(shù)和環(huán)境,其中環(huán)境因素又包括了無菌試劑和材料、層流超凈工作臺、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、水浴鍋和冰箱等。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng)的消毒流程是:1.用消毒酒精擦拭臺面;2.打開超凈工作臺和細(xì)胞房的紫外燈,照射1~2h。值得注意的是,紫外燈開啟后,人不能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室內(nèi),紫外線對眼睛和裸露的皮膚均有危害。若要進(jìn)入,操作人員一定要先關(guān)閉紫外燈,待人離開后再重新打開。
相比之下,比林科漢智能化干霧消毒設(shè)備操作簡單、設(shè)備體積小、重量輕,通電后即開即用,隨時啟停,消毒者可在實(shí)驗(yàn)室外可遠(yuǎn)程控制,完成整個消毒過程,從而避免在正常時間及突發(fā)狀況下,操作人員為關(guān)閉設(shè)備而暴露在消毒過程中。面對細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室苛刻的設(shè)備損耗條件,比林科漢擁有優(yōu)秀的材料兼容性。對玻璃、不銹鋼、環(huán)氧樹脂等實(shí)驗(yàn)室常見材料腐蝕性小,是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室清潔消毒的更好選擇!
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