這篇文章是今年發(fā)的，利用ADAMTS-7設計了肽疫苗，目的是靶向ADAMTS-7調(diào)控的ECM重塑。

Result1：ADAMTS-7肽疫苗有效B細胞表位的設計與篩選

復習一下ADAMTS-7的結(jié)構(gòu)：金屬蛋白酶結(jié)構(gòu)域是其降解活性的關(guān)鍵，C末端四個TSP-1樣重復序列結(jié)合COMP和TSP-1。

疫苗的制作過程：設計三種抗原肽作為B細胞特異性表位，與載體蛋白KLH結(jié)合，隨后加入明礬佐劑

隨后取小鼠注射，在第二次注射之后結(jié)扎左頸總動脈，結(jié)扎后四周內(nèi)，三種抗體滴度均上升。

特別地，E1能夠顯著減少內(nèi)膜面積

因此，E1抗體具有很大潛力。

Result2：注射ATS7疫苗免疫可抑制小鼠鋼絲損傷后新生內(nèi)膜形成

給小鼠注射兩次，然后進行頸總動脈或股動脈的鋼絲損傷。抗體滴度隨時間升高。

ATS7vac能夠抑制損傷頸總動脈的新內(nèi)膜形成

股動脈類似

Result3：ATS7vac免疫可減輕高脂血癥ApoE/-和LDLR-/-小鼠的動脈粥樣硬化病變

這一部分驗證了疫苗對動脈粥樣硬化的預防作用和緩解作用。

動脈粥樣硬化造模方式包含兩種，一是敲除ApoE，二是敲除LDLR。正文中主要是前者。注射兩次疫苗之后，飼喂高脂飲食，監(jiān)測抗體滴度穩(wěn)定。測斑塊面積，顯著小于對照組。

分別染斑塊、膠原、巨噬細胞，都少于對照組，而且斑塊組成沒有區(qū)別。

前面是“預防”，接下來是“緩解”

高脂飲食四周之后注射疫苗。

斑塊面積明顯更小。

Result4：小鼠接種ATS7vac后安全性和T細胞活化的評價

對接種C57BL/6小鼠的生理、組織學、血液生化和血液學指標與未接種小鼠進行了比較。ATS7vac的應用不會引起小鼠明顯的器官損傷或造血功能障礙。

并且，具有B細胞表位的E1主要誘導體液免疫反應，而不會引起T細胞介導的對內(nèi)源性ADAMTS-7的自身免疫反應。

Result5：接種ATS7vac可減輕豬冠狀動脈支架內(nèi)內(nèi)膜增生

對豬冠狀動脈支架植入術(shù)后再狹窄進行了臨床前評估，ADAMTS-7在冠狀動脈支架中顯著上調(diào)，而在未支架的對照動脈中，ADAMTS-7的表達水平較低。

建立豬的支架內(nèi)再狹窄模型

植入后28天，疫苗組的心內(nèi)膜面積、再狹窄率都較低

這一部分證明了疫苗對支架植入后再狹窄的抑制作用

Result6：ATS7vac疫苗產(chǎn)生特異性靶向ADAMTS-7的抗體

這一部分的目的是證明這個疫苗的特異性。在鼠和豬的血清中都驗證了僅對ADAMTS-7結(jié)合

隨后進行了一個奇怪的血液循環(huán)配對實驗。將免疫過的小鼠與沒有免疫的小鼠建立了配對血液循環(huán)，共享白細胞，在培養(yǎng)第五周之后發(fā)現(xiàn)二者體內(nèi)抗體滴度接近。

CD45.1小鼠也具有了抑制內(nèi)膜增生的功能

這一部分證明ATS7vac對新生內(nèi)膜形成的抑制主要是體內(nèi)免疫產(chǎn)生針對ADAMTS-7的抗體的結(jié)果。? ////不明白的地方：為什么要這么干？是在排除什么情況？？？

Result7：ATS7vac免疫產(chǎn)生的抗體中和血管重構(gòu)中的ADAMTS-7

這里對疫苗發(fā)揮作用的具體機制進行了驗證

鋼絲損傷后，ADAMTS-7在動脈中呈時間依賴性上調(diào)，在由內(nèi)皮細胞(ECs)和VSMCs組成的新內(nèi)膜中表達最為顯著。

疫苗能降低TSP-1的降解程度

過表達ADAMTS-7能夠抑制細胞遷移和增殖，而疫苗可以逆轉(zhuǎn)

還可以加速內(nèi)皮修復

抑制COMP降解

抑制平滑肌遷移

Discussion

1. 本文的最重大貢獻：設計ADAMTS-7疫苗，在小鼠和豬模型中有效抑制損傷后新內(nèi)膜形成和動脈粥樣硬化。

2. 基于B細胞表位，不影響T細胞

3. 使用的載體蛋白是KLH，它具有涉及T細胞表位的高免疫原性，并誘導CD4+ T細胞分化，有利于抗體的產(chǎn)生。明礬佐劑主要激活輔助性T2分化，避免細胞毒性損傷。

讀完感覺好厲害

孔老師組關(guān)于ADAMTS-7的文章就讀完了。從通過生信方法篩選出ADAMTS-7，中間經(jīng)歷對其致病機制的研究和完善，到最后設計出疫苗，歷時14年。一路讀下來感覺蕩氣回腸。

免疫部分還是讀不明白，會不會下學期學完免疫會好一點。另感覺現(xiàn)在的心血管研究不可避免都要涉及炎癥機制，但每次看到都一頭霧水，還是得好好學一下qwq