標(biāo)題：ANEXT安齡生物·外泌體轉(zhuǎn)化應(yīng)用的臨床挑戰(zhàn)

ANEXT安齡生物·外泌體在腫瘤微環(huán)境（TME）和免疫串?dāng)_中的作用

ANEXT安齡生物·外泌體在應(yīng)激反應(yīng)中的作用?

ANEXT安齡生物·外泌體生物標(biāo)志物在疫苗遞送中的作用

ANEXT安齡生物·外泌體組成及其在免疫應(yīng)答和多種疾病信號(hào)通路中的作用

與其他生物醫(yī)學(xué)研究類似，基于外泌體的應(yīng)用也因?qū)⒀芯哭D(zhuǎn)化到臨床而受到嚴(yán)重影響。外泌體研究最困難的方面是重現(xiàn)性、翻譯和從體外到體內(nèi)的召喚，同時(shí)保持一致性。

由細(xì)胞產(chǎn)生并從其上清液中收集的外泌體用于大多數(shù)早期外泌體研究。必須優(yōu)化與外泌體生產(chǎn)相關(guān)的多種條件，以實(shí)現(xiàn)驗(yàn)證和可重復(fù)性。從腫瘤細(xì)胞釋放的外泌體負(fù)責(zé)免疫抑制功能。癌細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體含有腫瘤相關(guān)抗原并排放到體液中表明腫瘤的存在。利用這一特性，分析外泌體的胰腺癌細(xì)胞蛋白質(zhì)組，并發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞和由它們衍生的外泌體中GPC1蛋白多糖富集（glypican 1）。患者血清中GPC1+外泌體（crExos）的存在可以使用熒光激活細(xì)胞分選（FACS）技術(shù)進(jìn)行測量。研究表明，使用GPC1 +外泌體可以促進(jìn)胰腺癌的早期診斷，并在疾病進(jìn)展的不同階段區(qū)分患者。調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞活性的能力取決于HNC患者的疾病活動(dòng)度，根據(jù)對頭頸癌（HNC）患者血漿中發(fā)現(xiàn)的外泌體的調(diào)查。然而，對常規(guī)用于定量人血清中外泌體的方案的可重復(fù)性、效率和可靠性知之甚少。如果可以引入和應(yīng)用廣義和ptimized協(xié)議，則可能會(huì)克服可重復(fù)性問題。

外泌體分離和表征技術(shù)正在不斷發(fā)展和適應(yīng)。不同的科學(xué)小組建立了分離和保存外泌體的方案。然而，在非人靈長類動(dòng)物的臨床前階段，外泌體的大規(guī)模生產(chǎn)具有挑戰(zhàn)性。因此，外泌體在cGMP指南下仍處于早期階段。然而，各種研究報(bào)告了外泌體生物發(fā)生的途徑，以操縱一些基因以增加外泌體的產(chǎn)生。 通常，采用兩種主要策略來增加外泌體的產(chǎn)生。首先，通過基因操縱以過表達(dá)在外泌體生物發(fā)生中起作用的激活基因并下調(diào)參與外泌體循環(huán)途徑的基因的卵子發(fā)生途徑。其次，調(diào)整細(xì)胞培養(yǎng)基，用特定療法處理，并限制某些可能迫使細(xì)胞產(chǎn)生更多外泌體的生理?xiàng)l件。必須考慮在放大和設(shè)備更換期間調(diào)整細(xì)胞表型的可能性。由于外泌體生物發(fā)生的動(dòng)力學(xué)才剛剛開始，任何因素的改變都可能改變外泌體的產(chǎn)生、組成、表面標(biāo)志物或功能。如前所述，除了細(xì)胞質(zhì)量擴(kuò)增要求外，還必須控制預(yù)先確定的生產(chǎn)環(huán)境參數(shù)，例如細(xì)胞的表型、培養(yǎng)pH值、CO2百分比，因此分泌外泌體特征。

近年來，外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)無疑取得了重大進(jìn)展。外泌體分離方法的進(jìn)步是這一現(xiàn)象的關(guān)鍵因素，但蛋白質(zhì)組分析改進(jìn)儀器的進(jìn)步以及靈敏度的提高使外泌體研究有了顯著改善。盡管在過去十年中取得了重大進(jìn)展，但仍有許多未解決的差距有待解決。例如，仍然沒有通用的外泌體標(biāo)志物可以精確識(shí)別這些囊泡并與其他EV區(qū)分開來。此外，體外和體內(nèi)研究跟蹤和表征外泌體的標(biāo)準(zhǔn)方法仍然不可用。然而，由于目前用于分離和表征的方法之間存在巨大的技術(shù)差異，外泌體研究的主題仍處于起步階段。必須解決這些技術(shù)障礙，以便能夠使用外泌體對癌癥和傳染病進(jìn)行診斷或預(yù)后監(jiān)測，并建立創(chuàng)新的基于外泌體的個(gè)性化療法。國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)是一個(gè)驅(qū)動(dòng)細(xì)胞外囊泡、外泌體和微囊泡分析師的全球?qū)W會(huì)。ISEV擁有2多名個(gè)體，其主要目標(biāo)是在國際上推進(jìn)細(xì)胞外囊泡研究。

隨著外泌體翻譯的大量努力，了解臨床轉(zhuǎn)化取得的進(jìn)展和持續(xù)的挑戰(zhàn)至關(guān)重要。盡管外泌體分析方法已經(jīng)有了巨大的發(fā)展，但生物發(fā)生的確切機(jī)制仍然未知。相反，需要改進(jìn)分離方法和純化來研究貨物內(nèi)容物、標(biāo)記物和功能，從而揭示生物發(fā)生機(jī)制和疾病狀況。一旦克服了這些缺點(diǎn)，就可以確定新的生物標(biāo)志物進(jìn)行表征，外泌體可用于診斷和藥物輸送應(yīng)用。此外，隨著對外泌體生物發(fā)生和功能的更多研究，將有很大的機(jī)會(huì)來操縱它們的組成、性質(zhì)、生物發(fā)生機(jī)制和細(xì)胞相互作用，以進(jìn)一步推進(jìn)其臨床應(yīng)用。外泌體作為診斷，檢測和治療應(yīng)用的潛在用途在很多研究中中得到了證明。綜上所述，開發(fā)高效、可重現(xiàn)、放大和可靠的分離方法對于該領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展迫在眉睫。為了充分利用初級研究的潛力，需要整合臨床數(shù)據(jù)和新興新技術(shù)，為外泌體的臨床轉(zhuǎn)化和治療應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。