色譜柱常見問題匯總(八)
一.CN柱的保存需要在低溫條件,但是又不能太低,使固定相凍結(jié),怎么控制這個(gè)溫度?怎么判斷固定相是否被凍結(jié)?固定相凍結(jié)后會(huì)是什么樣的現(xiàn)象?
? ? ? ?答:所謂低溫儲(chǔ)存,就是放到陰涼處或者放到冰箱的冷藏室。儲(chǔ)存液只要不是純水,冰點(diǎn)都比較低,純甲醇的冰點(diǎn)是零下90度以下了。
二.我們測(cè)試樣品時(shí),經(jīng)常會(huì)關(guān)心柱壓是否太高,但是在購(gòu)買色譜柱時(shí),并沒有說(shuō)每一根色譜柱的最大使用壓力是多少?針對(duì)這樣的情況,用戶怎么判斷柱壓是否超過該柱的極限?
? ? ? ?答:裝柱時(shí)的壓力比使用時(shí)高很多,所以柱壓對(duì)色譜柱本身在使用時(shí)沒有極限問題存在,倒是一般儀器有個(gè)40Mpa的上限。如果色譜分離度還能滿足分析方法要求,柱壓只要儀器能承受就OK吧。
三.使用緩沖液不當(dāng),使硅膠溶解并重新形成粉末后,會(huì)出現(xiàn)什么樣的異常情況?怎么處理?
? ? ? ?答:出現(xiàn)異常就是柱壓升高。小粉末在流動(dòng)相不斷沖洗帶動(dòng)下,最后會(huì)聚集在柱子出口端,沉積在后篩板。處理方法只有拆下后篩板進(jìn)行清洗或更換,但這樣做會(huì)影響到柱床,處理后柱效會(huì)下降。
四.今天才知道濾膜的材質(zhì)分了這么幾種:再生纖維素、聚四氟乙烯、硝酸纖維和醋酸纖維等,之前只知道有有機(jī)系和水系之分?各種不同材質(zhì)的濾膜適合于什么樣的樣品?
? ? ? ?再生纖維素膜:具有蛋白質(zhì)吸收低,適用于水溶性樣品和有機(jī)溶劑;
? ? ? ?聚四氟乙烯:適用于所有有機(jī)溶劑,酸和鹽;
? ? ? ?尼龍66:適用于絕大多數(shù)有機(jī)溶劑和水溶液,可用于強(qiáng)酸,70%的乙醇,二氯甲烷,不適用與二甲基甲酰胺;
? ? ? ?醋酸纖維:不適用有機(jī)溶劑,特別適用水基溶液。
五.我原來(lái)遇到個(gè)這樣的問題,一直不知道原因。剛拿柱子做,色譜條件是成熟的,絕對(duì)沒問題,但是該條件下保留的物質(zhì)變的不被保留,比如本來(lái)保留時(shí)間15分鐘卻怎么調(diào)比例都是2-3分鐘就出峰了,維護(hù)后,下次再使用又正常了,什么樣原因???
? ? ? ?答:最大可能是發(fā)生相塌陷了。C18柱和高密鍵合封尾的C8柱,在高含水流動(dòng)相下會(huì)發(fā)生相塌陷,后果就是保留能力大幅下降。用有機(jī)相比例較高的流動(dòng)相沖洗后,又可恢復(fù)正常性能。
總結(jié)
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