用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其他血清中可能會(huì)存在以下種類(lèi)的沉淀物：

1. 纖維蛋白：它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1-2mm，可以用肉眼觀察到。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的，一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài)，當(dāng)經(jīng)過(guò)最后的過(guò)濾分裝后，就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。

2. 磷酸鈣：它也是常見(jiàn)的一種沉淀物，通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。

3. 膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。他們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。最常見(jiàn)的沉淀物，就是在血清融化過(guò)程中有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)的沉淀，血清中包含絮狀沉淀是沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。要除去沉淀，離心血清（400g，1-2分鐘）或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。

按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

（1）解凍血清/分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

（2）勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

（3）血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。血清出現(xiàn)沉淀是血清的正常特性，各大品牌的血清均有沉淀的出現(xiàn)，海星生物根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)多年經(jīng)驗(yàn)，血清沉淀的多少與血清的使用效果沒(méi)有必然關(guān)系。建議更換新批次血清的時(shí)候，取少量細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試培養(yǎng)，以確定是否影響后續(xù)細(xì)胞生長(zhǎng)。

沉淀不是檢驗(yàn)血清的硬指標(biāo)，但為了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)美觀、實(shí)驗(yàn)便利，還是應(yīng)該盡量減少沉淀的產(chǎn)生。掌握正確的血清解凍、使用方法，再加上一款品質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)秀血清，對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，至關(guān)重要。

作者：Cas9x海星生物

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