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真核蛋白表達(dá)服務(wù)---艾柏森生物

2023-08-11 14:26 作者:艾柏森生物  | 我要投稿

真核蛋白表達(dá)服務(wù)是指利用真核細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)目標(biāo)蛋白質(zhì)并進(jìn)行純化的技術(shù)服務(wù)。這種服務(wù)通常適用于需要大量高質(zhì)量蛋白質(zhì)的應(yīng)用,如藥物開發(fā)、生物學(xué)研究和診斷試劑制備等領(lǐng)域。

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真核蛋白表達(dá)服務(wù)通常包括以下步驟:

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基因克?。簩⒛繕?biāo)基因克隆到真核表達(dá)載體中,以便在真核細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。

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細(xì)胞培養(yǎng):將表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞中,并在細(xì)胞培養(yǎng)條件下進(jìn)行表達(dá)。

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蛋白表達(dá):利用真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成機(jī)制進(jìn)行表達(dá),并進(jìn)行后續(xù)的蛋白質(zhì)修飾和折疊。

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蛋白純化:通過不同的蛋白質(zhì)純化技術(shù),如親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等,從細(xì)胞中提取和純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。

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真核蛋白表達(dá)服務(wù)通常由生物技術(shù)公司或服務(wù)提供商提供??蛻艨梢愿鶕?jù)自己的需求選擇不同的服務(wù)方案,以獲得最優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。

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蛋白表達(dá)服務(wù)圖

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真核蛋白表達(dá)量低的原因:

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真核蛋白表達(dá)量低的原因可以有很多,下面列舉一些常見的原因:

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轉(zhuǎn)染效率低:表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞時,有可能出現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率低的情況。轉(zhuǎn)染效率低會導(dǎo)致只有少數(shù)細(xì)胞表達(dá)目標(biāo)蛋白,從而使表達(dá)量降低。

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基因轉(zhuǎn)錄水平低:轉(zhuǎn)染后表達(dá)載體可能會受到細(xì)胞因子等的調(diào)節(jié),導(dǎo)致表達(dá)載體的轉(zhuǎn)錄水平低,從而降低表達(dá)量。

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翻譯后修飾不完整:蛋白質(zhì)翻譯后需要經(jīng)過一系列的修飾才能夠形成成熟的蛋白質(zhì),例如糖基化、磷酸化、甲基化等。如果這些修飾過程發(fā)生異常,就會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不完整,從而影響表達(dá)量。

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蛋白質(zhì)不穩(wěn)定:一些蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)較不穩(wěn)定,在表達(dá)過程中容易發(fā)生降解和失活,從而導(dǎo)致表達(dá)量降低。

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細(xì)胞毒性:表達(dá)載體可能會對細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用,導(dǎo)致細(xì)胞死亡或表達(dá)量降低。

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表達(dá)條件不適當(dāng):表達(dá)載體的表達(dá)條件(如溫度、培養(yǎng)時間、培養(yǎng)液組分等)不適當(dāng),也會導(dǎo)致表達(dá)量降低。

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針對上述原因,可以采取相應(yīng)的措施來提高真核蛋白表達(dá)量,例如優(yōu)化表達(dá)載體、優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件、優(yōu)化培養(yǎng)條件等。

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