FDA（二乙酸熒光素）

二乙酸熒光素 (FDA) 是一種可用作活力探針的細(xì)胞可透過性酯酶底物，可測量激活其熒光所需的酶活性和使其熒光產(chǎn)物保留在細(xì)胞內(nèi)所需的細(xì)胞膜完整性。被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解后，該 AM 酯會(huì)產(chǎn)生熒光素。二乙酸熒光素 (FDA)是一種非熒光疏水性熒光素衍生物，可以通過細(xì)胞膜，隨后細(xì)胞內(nèi)酯酶水解雙乙酸酯基團(tuán)，產(chǎn)生高度熒光的產(chǎn)品熒光素。 ?Fluorescein diacetate 是一種細(xì)胞滲透性的酯酶底物。Fluorescein diacetate 可作為人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶 Pi (hGSTP1-1) 的熒光底物。熒光 :λex 495 nm, λem 520 nm。

圖1.FDA（二乙酸熒光素）光譜圖

FDA使用案例（FDA-PI染色）

圖2.通過熒光素二乙酸鹽碘化丙啶（FDA-PI）染色確定的細(xì)胞活力。用FDA-PI原位對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行雙染色，并使用不同的濾光片（?100）在熒光顯微鏡下拍照?；罴?xì)胞染成綠色（A），而同一電場下的死細(xì)胞染成紅色（B）。這是一個(gè)展示該方法論的代表性領(lǐng)域。

CFDA（5-羧基熒光素二乙酸酯）

5-羧基熒光素二乙酸酯是一種重要的染色劑。滲透完整細(xì)胞膜的非熒光疏水劑。在細(xì)胞中，5-羧基熒光素二乙酸酯被酶水解成親水劑，強(qiáng)熒光5-羧基熒光素。熒光 :λex 290± 3 nm in methanol; λex 492± 3 nm, λem 520 ± 4 nm in Buffer pH 9。

圖3.cFDA染色乳酸桿菌粘附在通過熒光顯微鏡觀察到的腸上皮上（放大倍數(shù)40）。菌株258接種后一小時(shí)A-十二指腸;菌株231接種后1小時(shí)B-空腸;C-回腸陽性對(duì)照后4小時(shí)羅伊氏乳桿菌接種D-盲腸菌株206接種后4小時(shí)。