葡聚糖凝膠C-25（CM Sephadex C25）用于離子交換色譜、陽離子交換介質(zhì)、蛋白質(zhì)色譜、分離介質(zhì)和樹脂。葡聚糖凝膠C-25是范德生物自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的葡聚糖層析介質(zhì)? ， 具有高流速、低反壓、高動態(tài)載量及良好的化學(xué)穩(wěn)定性。葡聚糖凝膠C-25方便進 行規(guī)模放大， 可以縮短生產(chǎn)時間， 提高生產(chǎn)效率， 降低大規(guī)模生產(chǎn)成本。

葡聚糖凝膠C-25使用方法:

葡聚糖凝膠C-25是顆粒狀，使用時需要溶脹，其溶脹比取決于所使用的緩沖溶液，不同溶液中的溶脹比不同，而且存在較大差異。溶脹時不能使用磁力攪拌，否則易導(dǎo)致凝膠破碎。

※ 預(yù)處理:

稱取所需量的葡聚糖凝膠C-25，置于 50~100 倍蒸餾水或者上樣平衡液中，溶脹，室溫 條件下一般需要溶脹 1~2 天，沸水中一般需要 2 小時。

按每克葡聚糖凝膠C-25加 0.5M HCl 15ml 的比例，將葡聚糖凝膠C-25浸泡于 0.5M HCl 中， 攪勻， 靜置 30 分鐘， 裝入布氏漏斗（墊有 2 層濾紙）中抽濾， 并反復(fù)用蒸餾水抽洗至 pH

呈中性；然后以 0.5M NaOH 同上操作過程處理， 最后以 0.5M HCl 再處理一次。

※ 裝柱

裝柱按照標準操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度 ，凝膠裝柱前需要脫氣 。

※ 平衡

使用 2~5 倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子， 務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和 pH 同上樣緩沖液的

電導(dǎo)和 pH 完全一致。

※ 上樣

根據(jù)目標產(chǎn)物濃度和凝膠的載量確定上樣量 。

※ 清洗

上樣完畢后，再使用上樣緩沖液平衡柱子，清洗掉不結(jié)合的蛋白和雜質(zhì)，直至流出液的電 導(dǎo)和 pH 同上樣緩沖液的電導(dǎo)和 pH 完全一致。

※ 洗脫

使用增大緩沖液中鹽離子濃度或者增加 pH 的連續(xù)洗脫或者梯度洗脫。

※ 再生

在柱上先用 1~2M NaCl 洗去柱上的雜蛋白，再用蒸餾水洗去柱中鹽。然后按預(yù)處理過程將葡聚糖凝膠C-25再處理一遍即可 。

※ 存儲

葡聚糖凝膠C-25干粉保存于4~25℃ 、干燥 、通風(fēng)、清潔處；溶脹后的凝膠保存于4~8℃

20%乙醇溶液或 0.01M NaOH 中 。

※ 運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓， 嚴禁與有毒、有害物品混運。

葡聚糖凝膠C-25使用注意事項:

a. 柱的選擇：從理論上說， 只要柱足夠長，就可以獲得理想的分辨率，但由于層析柱流 速同壓力梯度有關(guān)，柱長增加使流速減慢， 峰變寬，分辨率降低；柱的直徑增加，使液體流動 的不均勻性增加，分辨率明顯下降。

b. 純化過程必須嚴格控制洗脫緩沖液的 pH 及離子強度。樣品與葡聚糖凝膠C-25必須 用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進行柱層析。

c.? 所裝的柱床必須表面平整， 無溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝 。

4. 洗脫過程中應(yīng)嚴格控制流速，且勿過快。

5. 上樣的體積要小， 濃度不宜過高。

6. 加樣及整個洗脫過程中，嚴防柱面變干。