別怕，別給“我”機(jī)會(huì)就好？

人類愈來(lái)愈恐慌了，我得意的笑，得意的笑……

為啥對(duì)付我這么難呢？當(dāng)然是因?yàn)槲液軠厝岬睦?。被我接觸過(guò)的人類，好多表面上沒(méi)有任何變化，跟健康人類一樣一樣的，這些人類帶著我四處浪，讓我見(jiàn)識(shí)大千世界的美麗，也認(rèn)識(shí)越來(lái)越多的人類；有些人類有輕微的感冒癥狀，這些人類特別堅(jiān)韌，以為稍微堅(jiān)持堅(jiān)持就沒(méi)事了，他們繼續(xù)工作、聚會(huì)，直到我在他們的身體中肆意侵略，讓他們的肺不勝重荷；還有一類人對(duì)我特別敏感，一見(jiàn)鐘情，最終歸于我的懷抱。當(dāng)然人類的智慧是不容小視的，我被圍追截堵，也有一點(diǎn)狼狽了呢。不過(guò)，千萬(wàn)別給我機(jī)會(huì)哦，因?yàn)槲矣斜Ｗo(hù)色， 現(xiàn)在的核酸檢測(cè)假陰性問(wèn)題讓我一次又一次成了漏網(wǎng)之魚(yú)。那么是技術(shù)不過(guò)關(guān)還是我太狡猾？

其實(shí)“我”也害怕？

核酸檢測(cè)主要有兩種方法：一種是基于深度測(cè)序的宏基因組測(cè)序(mNGS)，我的堂兄SARS病毒品遠(yuǎn)高于我，那時(shí)人類可沒(méi)有這么先進(jìn)的技術(shù)，而我一露面就被一覽無(wú)余。這種方法的使用有一定的局限性，步驟較多，周期較長(zhǎng)，對(duì)操作者的要求也高，病人可等不了這么久，用作診斷不太合適。

檢測(cè)流程如下▼

而核酸定量檢測(cè)技術(shù)(RT-PCR)是一個(gè)非常成熟的技術(shù)，靈敏性、檢測(cè)限都非常棒，用作診斷更具實(shí)操性。更何況我的序列早就公布于世，設(shè)計(jì)引物或者探針都非常的方便?？上z測(cè)難點(diǎn)不在于此，關(guān)鍵在于我的載量很低，跟宿主的核酸量相比就像一滴墨水滴入一杯水中，可想而知檢測(cè)的準(zhǔn)確性和難度如何。在平常的核酸定量中Ct≥35，可信度降低，結(jié)果供參考；而在檢測(cè)我的時(shí)候，有的檢測(cè)試劑盒約定Ct≤38，則為陽(yáng)性，有試劑盒約定不大于40為陽(yáng)性。檢測(cè)為陽(yáng)性，可以確診，可是檢測(cè)為陰性就不一定是真的陰性哦。

RT-PCR與mNGS原理對(duì)比示意圖▼

如何得到“我”？

不管哪種核酸檢測(cè)方法，采集標(biāo)本是關(guān)鍵的關(guān)鍵。怎么有效得到我去研究呢，請(qǐng)看：

A、鼻拭子標(biāo)本

采集病人發(fā)病3日內(nèi)的鼻拭子標(biāo)本，用無(wú)菌植絨拭子采樣，將拭子貼鼻孔壁慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)進(jìn)入病人一鼻孔內(nèi)，至鼻腭處，然后邊擦拭邊旋轉(zhuǎn)慢慢取出。以同一拭子擦拭另一鼻孔；迅速將纖維拭子放入裝有2ml裂解液（與核酸提取試劑盒中裂解液相同）并貼有條形碼的標(biāo)本管中，在靠近頂端處折斷無(wú)菌拭子桿，旋緊管蓋并用封口膜封閉。

B、咽拭子標(biāo)本

采集病人發(fā)病3日內(nèi)的咽拭子標(biāo)本，用無(wú)菌植絨拭子采樣，適度用力拭抹咽后壁部位，應(yīng)避免觸及舌部；迅速將無(wú)菌纖維拭子放入裝有2ml裂解液并貼有條形碼的標(biāo)本管中，在靠近頂端處折斷拭子桿，旋緊管蓋并用封口膜封閉。

C、痰液標(biāo)本

收集深部咳嗽痰液或抽吸痰于一次性無(wú)菌旋蓋采樣杯中，采樣杯預(yù)先貼好條碼，采樣杯中裝入2ml生理鹽水。

D、肺泡灌洗液（BALF）

由臨床醫(yī)生無(wú)菌操作下吸取10ml～20ml BALF（≥5 ml）到貼有條形碼并帶螺帽無(wú)菌容器中。

E、糞便標(biāo)本

如患者發(fā)病早期出現(xiàn)腹瀉癥狀，則留取糞便標(biāo)本3-5g(黃豆大小),標(biāo)本收集于含2ml生理鹽水并貼有條形碼的帶螺帽標(biāo)本采集管中。

F、血液標(biāo)本

使用含有EDTA抗凝劑的真空釆血管采集血液標(biāo)本2-4ml。

咽拭子和鼻咽拭子可直接用于核酸提取，當(dāng)實(shí)驗(yàn)室條件不夠時(shí)可增加病毒滅活步驟。血液標(biāo)本，需要取血漿提取核酸。對(duì)痰液、肺泡灌洗液和大便標(biāo)本應(yīng)充分振蕩混勻后進(jìn)行病毒滅活（水浴箱預(yù)熱至56℃，將需要滅活的標(biāo)本從密封袋中取出，放入水浴鍋中的試管架上，標(biāo)本蓋上擱置重物防止標(biāo)本采集管漂浮。每隔10min將標(biāo)本搖勻一次，滅活時(shí)間40min）　痰液或肺泡灌洗液中如果有濃痰無(wú)法吸樣時(shí)，可嘗試進(jìn)行液化處理，在滅活標(biāo)本中加入4倍體積4% NaOH,室溫放置10min, 12000rpm離心5min,去上清后加入生理鹽水懸浮，12000rpm離心5min，去上清后再用生理鹽水懸浮，12000rpm離心5min，去上清后留約200μL用于核酸提取。

切記，切記，這樣來(lái)收集我可以提高檢測(cè)成功率哦。

而核酸提取等后續(xù)的檢測(cè)都有對(duì)應(yīng)的商品化試劑盒。似乎并不復(fù)雜，對(duì)吧？

聽(tīng)說(shuō)“坦白從寬”？

為什么我這么坦白呢？因?yàn)榫ê怂釞z測(cè)的大部分專業(yè)人員被迫隔離而停工，或者由于沒(méi)有專業(yè)的防護(hù)實(shí)驗(yàn)室而無(wú)法開(kāi)展檢測(cè)。而醫(yī)護(hù)人員更精通治病救人，在核酸檢測(cè)方面略遜一籌。我在細(xì)胞內(nèi)的繁殖速度超快，不易被消滅；一旦我被脫去外衣（提取成RNA）后變得極其脆弱，很容易被環(huán)境中的RNA酶降解。含量低穩(wěn)定性差，被檢測(cè)為陰性就太理所當(dāng)然了。

但我似乎也不能高興的太早了，聽(tīng)說(shuō)新英格蘭雜志發(fā)表的文獻(xiàn)中，已經(jīng)給出感染后抗體的變化規(guī)律（包括IgM和IgG）。雖然抗體的生產(chǎn)比核酸定量檢測(cè)試劑盒難多了，但現(xiàn)在全球都在加緊研發(fā)進(jìn)度，攻克難題指日可待。待那時(shí)我可能會(huì)潛伏起來(lái)，等待新的機(jī)會(huì)……

END

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