撰文：南方醫(yī)科大學(xué) Mie

專家審核：江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院 李晶 教授

根據(jù)Nature Reviews Drug Discovery 的最新分析，截止2022年4月15日，全球共有2756個針對免疫腫瘤學(xué)的細(xì)胞療法處在活躍開發(fā)狀態(tài)中，從腫瘤的類型來看，針對實體腫瘤的細(xì)胞臨床研究數(shù)量比前些年增加。從細(xì)胞類型來看，基于自然殺傷細(xì)胞（NK）療法的臨床管線也越來越多，其中CAR-NK治療實體瘤成為當(dāng)下備受關(guān)注的新熱點(diǎn)。

日前，波蘭羅茲醫(yī)科大學(xué)研究者在國際分子科學(xué)雜志（International journal of molecular sciences）發(fā)表了關(guān)于CAR-NK細(xì)胞治療實體瘤的綜述[1]，介紹了CAR-NK細(xì)胞治療各種實體瘤的現(xiàn)狀。

01CAR-NK細(xì)胞療法的優(yōu)勢

NK細(xì)胞是機(jī)體的第一道防線，其具有抗體依賴的細(xì)胞毒性(ADCC)作用以及可以產(chǎn)生大量細(xì)胞因子、趨化因子和生長因子，能自發(fā)殺傷腫瘤細(xì)胞和病原體，并參與機(jī)體的抗腫瘤免疫監(jiān)視和免疫應(yīng)答。

近年來，CAR-T細(xì)胞療法成為治療血液腫瘤患者的里程碑，但CAR-T細(xì)胞療法仍有缺點(diǎn)需要克服，包括生產(chǎn)耗時長、需要先進(jìn)的技術(shù)支持、費(fèi)用昂貴且具有顯著毒性特征。鑒于此，用NK細(xì)胞替代T細(xì)胞，即CAR-NK細(xì)胞療法，可能是一種更好的替代方案，既保持了CAR-T細(xì)胞療法的有效性，又沒有其缺點(diǎn)。

CAR-NK細(xì)胞療法利用基因工程修飾，加上特異性的CAR結(jié)構(gòu)，可增強(qiáng)其活性、數(shù)量及腫瘤靶向性，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，完成其抗腫瘤使命。

相比于其他免疫細(xì)胞，CAR-NK細(xì)胞療法在癌癥免疫治療中的優(yōu)勢包括快速有效的反應(yīng)，不會引發(fā)移植物抗宿主病，輕微甚至沒有細(xì)胞因子釋放綜合征，并且沒有神經(jīng)毒性，來源廣泛，可大規(guī)模衍生。

以上種種優(yōu)勢使其有希望成為“現(xiàn)貨”細(xì)胞治療產(chǎn)品和CAR-T細(xì)胞療法繼任者。

因此，CAR-NK細(xì)胞療法治療癌癥是目前腫瘤學(xué)領(lǐng)域的一個熱門話題，引起了眾多研究者的極大興趣。

02CAR-NK細(xì)胞治療實體腫瘤的進(jìn)展

近年來，CAR-NK細(xì)胞療法已經(jīng)在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)、乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌等中進(jìn)行了廣泛研究，證實了其對于實體腫瘤的治療效果。

膠質(zhì)母細(xì)胞瘤：在所有實體瘤中，CAR-NK細(xì)胞治療在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤領(lǐng)域獲得了最廣泛的臨床前數(shù)據(jù)。

針對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者中開展的幾項CAR-T細(xì)胞療法臨床試驗表明：雖然會出現(xiàn)初步療效，但高抗腫瘤活性會導(dǎo)致癌細(xì)胞亞群中的抗原迅速喪失，使癌細(xì)胞很快就會對CAR-T療法產(chǎn)生耐藥性。此問題急需解決。

而隨著時間發(fā)展，相關(guān)研究者結(jié)合CAR-T細(xì)胞療法治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的不足，發(fā)現(xiàn)可以通過用靶向突變和野生型EGFR的雙特異性CAR構(gòu)建體轉(zhuǎn)導(dǎo)的CAR-NK治療來防止CAR-NK療法出現(xiàn)這種情況，且臨床前實驗證實此方法改造后的CAR-NK治療可更好延長膠質(zhì)母細(xì)胞瘤異種移植小鼠模型的存活時間。

乳腺癌：靶向幾種不同抗原的CAR-NK細(xì)胞在體外和體內(nèi)模型中證明了對乳腺癌的療效。

如研究構(gòu)建了乳腺癌異種移植模型，發(fā)現(xiàn)相比未修飾的NK-92MI細(xì)胞，對NK-92MI細(xì)胞系進(jìn)行了額外修飾、以恢復(fù)CD16表達(dá)構(gòu)建得到的CAR-NK細(xì)胞，對表達(dá)TF的乳腺癌細(xì)胞具有更優(yōu)異的抗腫瘤活性以及作用。

此外，在EpCAM陽性乳腺癌細(xì)胞系中，表達(dá)EpCAM 導(dǎo)向的CAR和IL-15的 NK92細(xì)胞比未修飾的NK92細(xì)胞表現(xiàn)出選擇性和優(yōu)越的細(xì)胞毒性。

這些研究表明改造后的CAR-NK細(xì)胞對乳腺癌具有很好的效果，但迄今為止仍然需要更多的專門針對乳腺癌患者進(jìn)行 CAR-NK 治療的臨床試驗，以提供更多的臨床佐證。

卵巢癌：多項研究分析了CAR-NK細(xì)胞療法在卵巢癌模型中的有效性。

CAR-NK 細(xì)胞療法可靶向多個卵巢癌細(xì)胞表達(dá)受體，如表達(dá)CD24的卵巢癌細(xì)胞系，表達(dá)間皮素（MSLN）的卵巢癌細(xì)胞系，在臨床前研究中，構(gòu)建卵巢癌異體移植模型以及構(gòu)建相應(yīng)的受體導(dǎo)向CAR-NK細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤活性更高，效果更好，小鼠存活時間更長。

胰腺癌：因胰腺癌具有豐富的免疫抑制基質(zhì)，大多數(shù)過繼性細(xì)胞療法的體內(nèi)研究報告所取得的效果并不盡人意。在 CAR-NK 細(xì)胞開發(fā)中，已經(jīng)進(jìn)行了多次嘗試來克服胰腺癌的這種敵對特征。

2017年開展了一項I期臨床試驗，構(gòu)建了針對MUC1和PD-1的CAR-NK細(xì)胞，將CAR-NK細(xì)胞輸注于8名患有PD-1和MUC1陽性表達(dá)的不同癌癥類型（包括胰腺癌）的患者中。在接受治療及隨訪期間，有7名患者病情穩(wěn)定；所有患者在接受治療以及隨訪期間沒有嚴(yán)重的不良事件。之后陸續(xù)開展了II期臨床試驗，進(jìn)一步的臨床研究數(shù)據(jù)有待輸出。

CAR-NK另一個有希望的靶點(diǎn)是ROBO-1，目前有三項I/II期臨床試驗，旨在評估 ROBO-1導(dǎo)向的 CAR-NK細(xì)胞療法在胰腺癌和其他實體瘤中的安全性和有效性，這些結(jié)果備受期待。

03國內(nèi)外均有CAR-NK療法獲得臨床批件

隨著臨床前研究取得積極進(jìn)展，目前CAR-NK在國內(nèi)外均有研究項目獲得了臨床批件。

2021年，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心通過了一款我國自主研發(fā)的針對“晚期上皮性卵巢癌治療的靶向間皮素嵌合抗原受體NK細(xì)胞注射液”(簡稱：CAR-NK注射液)的臨床試驗申請。這標(biāo)志著我國的CAR-NK細(xì)胞療法實體瘤的研究邁入了新的里程碑!

2022年，F(xiàn)DA 批準(zhǔn)了FT536的研究性新藥申請[4]，F(xiàn)T536是一種同種異體、多重工程誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞衍生的自然殺傷（NK）細(xì)胞療法，旨在治療患有某些復(fù)發(fā)或難治性實體瘤的成年人。IND批準(zhǔn)將允許FT536開始參加1期多臂劑量遞增研究，以確定FT536對晚期非小細(xì)胞肺癌、結(jié)直腸癌、頭頸癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌等實體瘤患者的安全性、臨床活性和最大耐受劑量。

04展望

免疫系統(tǒng)在惡性腫瘤的生長和進(jìn)展中起主要作用。在免疫抑制性腫瘤微環(huán)境的影響下，免疫活性細(xì)胞群被重新編程以支持腫瘤的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力，與此同時，其抗腫瘤活性很少能被保留。許多研究者針對這一方面對免疫細(xì)胞進(jìn)行改造，以提高其腫瘤殺傷能力，從而開發(fā)了一系列過繼細(xì)胞療法。而這些研究極大地提高了許多癌癥患者的預(yù)后。近年來，以NK細(xì)胞為基礎(chǔ)的癌癥治療領(lǐng)域呈指數(shù)級增長，目前已成為免疫治療創(chuàng)新的熱門領(lǐng)域之一。在實體腫瘤領(lǐng)域，隨著CAR-NK臨床研究的逐漸開展，未來值得期待。

參考文獻(xiàn)：

[1] Wrona, Ewa et al. “CAR-NK Cells in the Treatment of Solid Tumors.” International journal of molecular sciences vol. 22,11 5899. 31 May. 2021,

鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34072732/

[2] Multhoff, Gabriele et al. “Targeted Natural Killer Cell-Based Adoptive Immunotherapy for the Treatment of Patients with NSCLC after Radiochemotherapy: A Randomized Phase II Clinical Trial.” Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research vol. 26,20 (2020): 5368-5379.

鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873573/

[3] 國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心

https://www.cde.org.cn/main/xxgk/listpage/9f9c74c73e0f8f56a8bfbc646055026d

[4] healio.com/news/hematology-oncology/20220112/fda-clears-ind-application-for-car-natural-killer-cell-therapy-to-treat-solid-tumors