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石蠟切片的HE染色

2022-11-20 00:42 作者:醬紫搬  | 我要投稿

石蠟切片的HE染色

1,脫蠟前

a,應(yīng)將組織切片在60攝氏度恒溫箱中烘烤20分鐘

b二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯后再浸泡10分鐘

c,再將組織切片于無水乙醇,95%乙醇,75%乙醇等各級酒精中洗掉二甲苯

d,逐漸增加水分,每次浸泡5分鐘,然后放入蒸餾水中

注意:脫蠟要徹底,時間寧長勿短

2,蘇木素染核

時間大概5分鐘,自來水洗,足夠時間的水洗可使蘇木素的顏色表現(xiàn)為藍(lán)色并固定下來

3,觀察效果

a,細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色

b,軟骨基質(zhì),鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色

c,粘液成灰藍(lán)色

注意:若染色過深可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán)

d,再用胞漿染料伊紅染胞漿,伊紅的染色時間通過組織與伊紅的親和力不同進行調(diào)整

染色結(jié)束用自來水洗

注意:蘇木素和伊紅染色之間不需要鹽酸酒精分化嗎 需要

結(jié)果

細(xì)胞漿,紅細(xì)胞,肌肉,結(jié)締組織,嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比

4,脫水

用從低到高濃度的酒精進行脫水,

但因低濃度酒精對伊紅有分化作用,將切片于60攝氏度恒溫烤箱烘烤15分鐘脫水效果更好

二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯再浸泡10分鐘

封固時所用的封固劑濃度應(yīng)適宜,樹膠不宜過多以免溢出,也不宜過少,以致切片暴露在空氣中而褪色或干燥,也不宜過稀,以免溢出玻片周圍


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