石蠟切片的HE染色

石蠟切片的HE染色

1,脫蠟前
a,應(yīng)將組織切片在60攝氏度恒溫箱中烘烤20分鐘
b二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯后再浸泡10分鐘
c,再將組織切片于無水乙醇,95%乙醇,75%乙醇等各級酒精中洗掉二甲苯
d,逐漸增加水分,每次浸泡5分鐘,然后放入蒸餾水中
注意:脫蠟要徹底,時間寧長勿短
2,蘇木素染核
時間大概5分鐘,自來水洗,足夠時間的水洗可使蘇木素的顏色表現(xiàn)為藍(lán)色并固定下來
3,觀察效果
a,細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色
b,軟骨基質(zhì),鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色
c,粘液成灰藍(lán)色
注意:若染色過深可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán)
d,再用胞漿染料伊紅染胞漿,伊紅的染色時間通過組織與伊紅的親和力不同進行調(diào)整
染色結(jié)束用自來水洗
注意:蘇木素和伊紅染色之間不需要鹽酸酒精分化嗎 需要
結(jié)果
細(xì)胞漿,紅細(xì)胞,肌肉,結(jié)締組織,嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比
4,脫水
用從低到高濃度的酒精進行脫水,
但因低濃度酒精對伊紅有分化作用,將切片于60攝氏度恒溫烤箱烘烤15分鐘脫水效果更好
二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯再浸泡10分鐘
封固時所用的封固劑濃度應(yīng)適宜,樹膠不宜過多以免溢出,也不宜過少,以致切片暴露在空氣中而褪色或干燥,也不宜過稀,以免溢出玻片周圍
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