2022年7月28日，國家衛(wèi)健委、國家市場監(jiān)管總局2022年第3號公告發(fā)布了GB 4789.2-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》等36項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)和3項(xiàng)修改單。其中食品微生物檢測中應(yīng)用廣泛的菌落總數(shù)測定方法標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.2-2022?（以下簡稱新標(biāo)準(zhǔn)）將于2022年12月30日起正式實(shí)施。

本文就新舊標(biāo)準(zhǔn)的差異專門比較，僅供參考：

一.主要變化如下：

a、細(xì)化了一些操作的描述；?

b、修改了檢樣的稀釋度要求；?

c、修改了培養(yǎng)基的溫度；?

d、修改了計數(shù)判讀規(guī)則等。

二、標(biāo)準(zhǔn)的具體修改情況對比?

1) 修改了設(shè)備與材料，由原來溫度范圍較窄的“恒溫水浴箱：46℃±1℃”，改為“恒溫裝置：48 ℃±?2℃”。

2）修改了培養(yǎng)基和試劑，由原來的“磷酸鹽緩沖液”，改為“無菌磷酸鹽緩沖液”；增加了“4.2菌落總數(shù)測試片：應(yīng)符合?GB4789.28?中平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基質(zhì)量控制要求”。

3）規(guī)范了標(biāo)準(zhǔn)中的表述，將操作步驟中“磷酸鹽緩沖液”修改為“無菌磷酸鹽緩沖液”；將“生理鹽水”修改為“無菌生理鹽水”。

4）檢驗(yàn)程序中“培養(yǎng)”和“計數(shù)各平板菌落數(shù)”之間增加了時間和溫度，使檢驗(yàn)程序更 加完整，更加清晰直觀。

5）修改了檢驗(yàn)程序，將“樣品均液”改為“樣品勻液”。

6）樣品的稀釋部分，將“選擇2個~3個適宜稀釋度的樣品勻液”;修改為“1個～3個適宜稀釋度的樣品勻液”；將“無菌平皿”修改為“無菌培養(yǎng)皿”；將“樣品置盛有”修改為“樣品置于盛有”，使標(biāo)準(zhǔn)更加通順嚴(yán)謹(jǐn)。?

7）液體樣品的稀釋部分，增加了“或放入盛有225mL 稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2min，制成1:10的樣品勻液”，這樣稀釋部分的選擇性更廣，實(shí)施起來更為方便。?

8）操作步驟中，對樣品的混勻設(shè)備進(jìn)行明確的要求，對培養(yǎng)基的溫度也進(jìn)行了調(diào)整與擴(kuò)充，將溫度“46℃”改為“48 ℃±2 ℃”。該條款中的“恒溫水浴箱”也相應(yīng)的修改為“恒溫裝置”。

9）將原來的6.2.1和6.2.2合并為“6.2.1 待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃ 培養(yǎng)48h?±2 h。水產(chǎn)品 30 ℃±1 ℃培養(yǎng) 72 h±3 h。如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫?生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基，凝固后翻轉(zhuǎn)平板，進(jìn)行培養(yǎng)?！?

10）“6.2.2 如使用菌落總數(shù)測試片,測試片應(yīng)按照相關(guān)技術(shù)規(guī)程操作?！?

11）因6.2.1有防止菌落在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的處理，刪除了“7.2.3 若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落蔓延?！?

12）增加了“附錄B”結(jié)果計數(shù)示例。?

小?結(jié)

新版標(biāo)準(zhǔn)最大的改變點(diǎn)：

1、稀釋度的選擇

2016版標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，選“2-3個適宜稀釋度的樣品勻液”進(jìn)行檢測；新標(biāo)準(zhǔn)2022版中則為選“1-3個適宜稀釋度的樣品勻液”進(jìn)行傾注。新標(biāo)準(zhǔn)這樣規(guī)定，表面看來是更寬松了，可以允許檢驗(yàn)者選擇1個稀釋度進(jìn)行計數(shù)，其實(shí)這一規(guī)定實(shí)際上對檢驗(yàn)人員的要求更高了。對于菌落總數(shù)檢測不出來或者含量極少的可以；但是如果樣品中菌落超過300或者更高的話，只做一個稀釋度，你能選擇到合適的稀釋倍數(shù)嗎？所以，為了檢測的嚴(yán)謹(jǐn)性，小編還是建議盡量多做選幾個稀釋度來計數(shù)，以期得出最真實(shí)的檢驗(yàn)結(jié)果。

2、培養(yǎng)基的溫度

2016版標(biāo)準(zhǔn)中，指定用“恒溫水浴箱”，2022版標(biāo)準(zhǔn)改成了“恒溫裝置”，這種表述更加寬泛，只要能達(dá)到“恒溫”的目的就行，不拘泥于水浴箱或其它保溫恒溫裝置。培養(yǎng)基的溫度要求從具體的點(diǎn)（46℃）擴(kuò)展到了一個范圍（46℃～50℃），這樣得出的結(jié)果除了人員操作造成的差異外，溫度的差異是不是也會造成檢測結(jié)果的不同呢？

在實(shí)際工作中小編發(fā)現(xiàn)，對于一般的水產(chǎn)品制品微生物，46℃傾注計數(shù)的結(jié)果和48℃傾注計數(shù)的結(jié)果的確有差異，那么如果再提高到50℃，這種差異是否會更加明顯？大家是不是對于這一點(diǎn)也比較疑惑呢？

3、試驗(yàn)操作

對于試驗(yàn)過程中的一些操作，2022版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了更加細(xì)化的描述，比如6.1.3中，明確描述為稀釋液需要“在振蕩器上振蕩混勻，制成1∶100的樣品勻液”，而不再沿用2016版本中“振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1∶100的樣品勻液”的說法。這一描述更加規(guī)范，也更加科學(xué)。

來源：食品微生物檢測公眾號“?hhy”原創(chuàng)文章
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