咳嗽是呼吸系統(tǒng)疾病最常見的主要癥狀之一，也是人體的一種保護(hù)性呼吸反射動作。通過咳嗽反射雖能有效清除呼吸道內(nèi)的分泌物或進(jìn)入氣道的異物，但咳嗽也有其不利的一面，如長期，頻繁，劇烈咳嗽影響工作，休息，甚至引起喉痛，音啞和呼吸肌痛，劇烈咳嗽可導(dǎo)致呼吸道出血。動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ妥鳛檠芯抗ぞ撸瑸槿祟惪人缘难芯刻峁┝死碚撘罁?jù)。本文通過對咳嗽動物模型的相對全面的介紹，特別是對相關(guān)模型的評價(jià)，為研究咳嗽反應(yīng)性增高的外周和中樞性機(jī)制提供思路，為今后人類咳嗽的特異性治療提供理論基礎(chǔ)。

?動物的選擇

主要有豚鼠、大鼠、小鼠、犬。

豚鼠是篩選鎮(zhèn)咳藥的常用動物。

其具有的優(yōu)勢：

①可在清醒、不限制活動的狀態(tài)下進(jìn)行；豚鼠在麻醉狀態(tài)下保存了機(jī)械刺激誘發(fā)的咳嗽反射；

②豚鼠對枸櫞酸、辣椒素刺激引發(fā)的咳嗽反射與人類十分相似；

③在制備豚鼠咳嗽模型時(shí)，給予 β- 腎上腺素受體激動劑預(yù)處理，可以抑制豚鼠氣管痙攣，保證咳嗽反射研究的準(zhǔn)確性；

④豚鼠的咳嗽聲響亮，結(jié)果應(yīng)以能聽到的咳嗽聲計(jì)算。實(shí)驗(yàn)豚鼠應(yīng)預(yù)先挑選，5min 內(nèi)咳嗽次數(shù)少于10次者棄除。豚鼠咳嗽時(shí)，有伸出前腳、頸部伸向前、張口等特征性體位出現(xiàn)。

犬特別適用于觀察鎮(zhèn)咳作用持續(xù)時(shí)間。

小鼠和大鼠的咳嗽反射不敏感，且與人類咳嗽反射差異較大，不是咳嗽模型的理想動物。給予化學(xué)刺激雖能誘發(fā)咳嗽，但噴嚏和咳嗽動作很難區(qū)別，變異較大，特別是反復(fù)刺激時(shí)變異更大，實(shí)驗(yàn)可靠性較差。

?造模方法

豚鼠機(jī)械刺激引咳法

造模方法：豚鼠體質(zhì)量400~500 g，雌雄均可。腹腔注射（ip）戊巴比妥鈉15 mg·kg-1淺麻醉下，背位固定，頸正中切口，暴露氣管，在距鎖骨 1.5 cm 的氣管前面剪開一個(gè)小孔，沿與氣管長軸成30°傾斜向氣管下端插入長2cm，直徑1.5cm的塑料管，將一根豬鬃經(jīng)塑料管向氣管內(nèi)插入，對氣管分叉黏膜進(jìn)行機(jī)械刺激，使引起咳嗽。給藥前，間隔10min連續(xù)兩次測得穩(wěn)定的咳嗽反應(yīng)后給藥，可用磷酸可待因（4mg·kg-1）為陽性對照。

小鼠氨水噴霧引咳法

造模方法：將小鼠置于 500 mL 玻璃鐘罩內(nèi)，通過空氣壓縮機(jī)連接玻璃噴霧頭，以 400mmHg 恒壓將氨水（25%~28%氫氧化銨）均勻的噴入鐘罩內(nèi)，噴霧5s，然后觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2min 內(nèi)咳嗽次數(shù)。對照組可用磷酸可待因30mg·kg-1，ip，30min后，噴霧。也可用噴托維林（咳必清，25~50mg·kg-1）用于止咳藥的初篩。

豚鼠枸櫞酸噴霧引咳法

造模方法：取體質(zhì)量200~250g的豚鼠，置于2~4 L容積的密閉鐘罩內(nèi)，用超聲霧化器以600mmHg 的恒壓，通過玻璃噴頭噴入 17.5% 枸櫞酸溶液霧化氣（要求通過玻璃噴頭的氣流速度為15L·min-1）。噴霧10s，記錄豚鼠咳嗽潛伏期；豚鼠咳聲響亮，容易記錄，故也可以咳嗽次數(shù)為觀察指標(biāo)，恒壓噴霧1min，記錄5min內(nèi)咳嗽次數(shù)。注意根據(jù)具體情況調(diào)整噴霧時(shí)間；實(shí)驗(yàn)前24h對豚鼠預(yù)篩，噴霧潛伏期＞2 min者或5min內(nèi)咳嗽次數(shù)少于10次者剔除?？捎昧姿峥纱颍? mg·kg-1）為陽性對照。

大鼠煙熏刺激引咳法?

造模方法：大鼠180~220g，每日上午將大鼠置于上方開放的20cm×40cm×60cm 半封閉的動物飼養(yǎng)箱中，被動吸煙2次，每次6支，持續(xù)10周。模擬大鼠可能接觸的被動吸煙煙霧濃度8g·（m3）-1（每支香煙自燃后約有1g煙草物質(zhì)形成側(cè)流煙霧）。80min后取出大鼠，給予100%番瀉葉溶液2mL·kg-1，灌胃（ig），每日1 次；ig 0.5 h 后，用噴霧器給每只大鼠全身均勻噴 4℃冰水 50 mL，濕潤皮毛，然后把大鼠置于電風(fēng)扇前（1400 r·min-1）吹干處置，30min。

結(jié)果提示，該造模方法能較好地復(fù)制咳嗽模型。在煙熏法復(fù)制的咳嗽模型基礎(chǔ)上再予番瀉葉ig及冰水濕身風(fēng)干法，誘導(dǎo)出脾腎陽虛慢性咳嗽病癥結(jié)合動物模型，方法具有可行性。

豚鼠煙熏刺激引咳法

慢性吸入紙煙煙霧可使豚鼠對刺激物的咳嗽反應(yīng)性增高，并可誘發(fā)自發(fā)性咳嗽。將正常豚鼠（250~350 g）置于容器中，吸入吸煙機(jī)產(chǎn)生紙煙煙霧，每次吸入煙霧5s 后，間隔吸入清新空氣10s，每支紙煙吸35次，共吸8支煙，約1h，每日2次，共2 周；再吸入致咳劑辣椒素或枸櫞酸，刺激誘發(fā)豚鼠咳嗽。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，慢性煙霧刺激誘發(fā)的豚鼠的咳嗽反應(yīng)性明顯增高。

注意：清醒與麻醉動物和人之間咳嗽反應(yīng)性存在著差異。因此進(jìn)行鎮(zhèn)咳藥篩選時(shí)，盡可能采用清醒動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以保證咳嗽反射的存在。即使采用麻醉，亦應(yīng)維持淺麻醉。麻醉劑選用，以氯醛糖（α-chloralose）較好，對咳嗽反射幾無影響；麻醉過深能明顯抑制咳嗽反射，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如以電刺激貓喉上神經(jīng)引咳，不宜采用巴比妥類麻醉，往往可因麻醉過深，使電刺激失去反應(yīng)；或者刺激閾可受麻醉深淺度的影響，變異較大，且不宜連續(xù)觀察藥物的作用。若以二甲基苯基哌嗪（DMPP） iv 引咳，如采用巴比妥類或氨基甲酸乙酯麻醉時(shí)，則不能引起咳嗽。

?總結(jié)

動物實(shí)驗(yàn)對于研究人類疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、病理生理、臨床治療和藥物試驗(yàn)等均有極其重要的意義。通過咳嗽動物實(shí)驗(yàn)，可了解并深入研究咳嗽反應(yīng)性增高的外周和中樞性機(jī)制?？v觀目前現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，很多動物模型尚需進(jìn)一步完善，許多觀察指標(biāo)的量化及標(biāo)準(zhǔn)化研究尚有待深入。

來源：

[1]卞如濂，謝強(qiáng)敏 . 鎮(zhèn)咳藥物的藥理實(shí)驗(yàn)方法［M］// 魏偉，吳希美，李元建 . 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué) . 第 4 版 . 北京：人民衛(wèi)生出版社，2010: 1150-1153.

[2]陸月明 . 咳嗽的動物模型研究方法［J］. 臨床肺科雜志, 2007, 12 （5）: 480-481.