CD169+ 巨噬細胞在成紅細胞島中的作用和機制探討
成紅細胞島(Erythroblastic islands,EBIs)特指中央巨細胞被周圍向紅系終未階段分化的成紅細胞圍繞成類似島嶼樣的結(jié)構(gòu),是紅系早期發(fā)育不可或缺的造血龕。CD169+骨髓定居的巨噬細胞對成紅細胞島(EBIs)的形成至關(guān)重要,但介導(dǎo)巨噬細胞與成紅細胞粘附的機制尚不清楚。
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抗原CD169或Siglec-1,最初是從骨髓、淋巴結(jié)、肝和脾中分離的一種巨噬細胞亞群發(fā)現(xiàn)的標記,這些細胞具有結(jié)合紅細胞的能力。淋巴結(jié)包膜下竇和髓質(zhì)區(qū)、脾邊緣區(qū)中的巨噬細胞高表達CD169。到目前為止,CD169 +巨噬細胞的信號傳導(dǎo)途徑和活化信息還不足,CD169+巨噬細胞與紅細胞生成、免疫耐受、腎臟疾病、抗病毒等密切相關(guān)。目前已知EMP -EMP、VCAM-1- α4β1、αv?-ICAM-4在成紅細胞島(EBIs)的形成過程中發(fā)揮作用,但是否還有其他粘附分子,如CD169,參與其中有待探索。
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來自空軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)教研室的研究人員成功構(gòu)建了CD169-CreERT小鼠,并利用其與 ROSA26tdTomato小鼠交配,他莫昔芬誘導(dǎo)后可特異性示蹤成紅細胞島中央巨噬細胞,同時骨髓定居的巨噬細胞和 BMDM特異性表達CD169。隨后,研究人員進一步在巨細胞與成紅細胞體外共培養(yǎng)的成島實驗中觀察到CD169抗體阻斷和CD169敲除均可削弱體外成紅細胞島(EBIs)的成島能力。
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為了進一步探索CD169對應(yīng)的受體,研究人員發(fā)現(xiàn)CD169重組蛋白可以粘附結(jié)合成紅細胞,結(jié)合已發(fā)表文獻,推測D43可能是CD169對應(yīng)的受體。研究人員使用流式及WB 結(jié)果證明成紅細胞表達CD43,其中CD43在早幼紅細胞上表達最高,隨著紅系發(fā)育成熟的過程CD43表達逐漸降低,而成熟紅細胞幾乎不表達CD43。進一步利用CD43 抗體阻斷成細胞進行體外成島觀察到巨噬細胞與成紅細胞的粘附發(fā)生減弱。
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然而,CD169敲除小鼠靜息態(tài)下骨髓中 成紅細胞島(EBIs)的形成并未受到影響,成紅細胞發(fā)育以及血常規(guī)也未見明顯異常,同時CD169 敲除并不影響成紅細胞島中央巨噬細胞其他黏附分子VCAM-1和αv的表達。
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CD169敲除小鼠在高海拔性紅細胞增多癥模型中成紅細胞島(EBIs)形成未見減弱,血常規(guī)與對照小鼠相比也無明顯差異,但骨髓中早幼紅細胞和中幼紅細胞的比例明顯增多,而成熟紅細胞的比例明顯下降,這一結(jié)果,提示CD169可能在紅系應(yīng)激狀態(tài)下通過CD43促進成紅細胞的分化。
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因此,研究人員認為,巨噬細胞表達的CD169與成紅細胞的受體CD43共同參與成紅細胞島(EBIs)的形成,同時CD43可作為成紅細胞發(fā)育過程分群的標志物,雖然CD169在體內(nèi)成紅細胞島(EBIs)形成中的作用并非必需,但CD169可能在紅系應(yīng)激狀態(tài)下通過CD43促進成紅細胞的分化。
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