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A431是一種人表皮樣癌細(xì)胞系。它廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，主要用于癌癥生物學(xué)、免疫腫瘤學(xué)和毒理學(xué)研究。此外，A431細(xì)胞過度表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR），因而被用作研究細(xì)胞周期和癌癥相關(guān)的細(xì)胞信號(hào)通路的有價(jià)值的體外模型。

1.BV2細(xì)胞的來源和一般特征
本節(jié)內(nèi)容將幫助您了解在使用A431細(xì)胞系之前需要知道的一般信息。例如，A431細(xì)胞系的來源是什么？A431細(xì)胞系的特征是什么？A431細(xì)胞的形態(tài)是怎樣的？A431細(xì)胞來自哪里？

• A431是一種人皮膚癌細(xì)胞系，是從一名85歲的女性表皮樣癌患者的表皮中獲得的[1]。它是由D.J. Giard等人建立的，他們從實(shí)體腫瘤中建立了許多其他細(xì)胞系。

• A-431細(xì)胞具有上皮形態(tài)，它們聚集并形成細(xì)胞團(tuán)簇。

• A431皮膚癌細(xì)胞系是超三倍體，該細(xì)胞系的模態(tài)染色體數(shù)為74，約在36%的細(xì)胞中存在。在細(xì)胞群體中，約1%也存在著更高倍性。

2.A431細(xì)胞系：培養(yǎng)信息在實(shí)際處理和維護(hù)細(xì)胞系培養(yǎng)之前，了解細(xì)胞培養(yǎng)信息至關(guān)重要。本節(jié)將幫助您了解培養(yǎng)A431細(xì)胞系的關(guān)鍵要點(diǎn)。比如你將會(huì)了解到：A431細(xì)胞的倍增時(shí)間是多少？A431癌細(xì)胞系是貼壁型還是懸浮型？A431使用哪種培養(yǎng)基？

培養(yǎng)A431細(xì)胞的關(guān)鍵要點(diǎn)
倍增時(shí)間：A431細(xì)胞的人口倍增時(shí)間在80~100小時(shí)之間。
生長(zhǎng)特性：A431是一種貼壁型細(xì)胞系。
傳代建議：1 x 10? cells/cm2的細(xì)胞密度對(duì)于A431細(xì)胞系是理想的。在這種密度下，細(xì)胞需要將近4天才能達(dá)到完全貼壁。貼壁細(xì)胞用PBS(1x)清洗，然后用Accutase溶液孵育。之后，細(xì)胞用培養(yǎng)基重懸并離心。收集到的細(xì)胞再度懸浮并加入新的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基：使用含有10%FBS、4.5 g/L Glucose、1.0 mM Sodium pyruvate、1.5 g/L NaHCO3和4 mM L-Glutamine的DMEM培養(yǎng)基來培養(yǎng)A431細(xì)胞系。培養(yǎng)基應(yīng)每周更換2至3次。
生長(zhǎng)條件：A431癌細(xì)胞在配備5%CO2源的加濕培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)，溫度為37°C。
儲(chǔ)存：凍存的BV2細(xì)胞需保持在-150°C以下的溫度，可以是液氮或冰箱。
凍存建議：A431細(xì)胞的高度推薦的冷凍培養(yǎng)基是CM-1或CM-ACF。通過緩慢冷凍的方法來冷凍細(xì)胞，每分鐘僅允許降低1°C的溫度，以保持細(xì)胞活力。
復(fù)蘇建議：冷凍的A431細(xì)胞在含有抗菌劑的37攝氏度水浴中解凍40至60秒。當(dāng)只剩下少量冰塊時(shí)，將細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并進(jìn)行離心。收集到的細(xì)胞被重新懸浮并分裝入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行生長(zhǎng)。
生物安全等級(jí)：建議使用生物安全級(jí)別一來處理和維護(hù)A431培養(yǎng)物。

3.A431細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)
A431細(xì)胞系具有獨(dú)特的特點(diǎn)，并提供了幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。以下是我們總結(jié)的一些。

優(yōu)點(diǎn)：
①過度表達(dá)的表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）：
A431細(xì)胞過度表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）。它們可以作為研究EGFR信號(hào)傳導(dǎo)及其在癌癥中的影響的陽性對(duì)照樣本。它們還用于評(píng)估新的癌癥療法。
②腫瘤形成能力：
A431細(xì)胞有腫瘤形成能力。它們可用于開發(fā)異種移植癌癥模型，這是研究腫瘤生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)和評(píng)估新的癌癥治療方法的寶貴工具。

缺點(diǎn)：
①基因異常：
A431是一個(gè)癌細(xì)胞系，含有可能使其與原始腫瘤特征有所不同的基因突變和改變。
②微生物污染：
A431容易受到微生物污染，主要是細(xì)菌污染。然而，通過保持標(biāo)準(zhǔn)的無菌培養(yǎng)條件，可以預(yù)防A431細(xì)胞培養(yǎng)中的此類污染。

4.A431細(xì)胞的研究應(yīng)用
A431細(xì)胞系在癌癥研究中被廣泛應(yīng)用。這里列出了這種皮膚癌細(xì)胞系的一些有前途的應(yīng)用。

癌癥生物學(xué)：皮膚癌細(xì)胞系A(chǔ)431是研究癌癥生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和侵襲的細(xì)胞和分子機(jī)制的重要研究工具。研究人員廣泛使用這個(gè)細(xì)胞系來深入研究不同癌細(xì)胞過程中涉及的細(xì)胞信號(hào)通路。 例如，2018年進(jìn)行的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路參與了癌細(xì)胞增殖，抑制該通路可引發(fā)A431皮膚腫瘤細(xì)胞的凋亡。另外，另一項(xiàng)研究還報(bào)道了PI3K/AKT/mTOR通路在皮膚癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）中的作用，表明該通路在癌癥發(fā)展和進(jìn)展中起著重要作用[3]。

藥物測(cè)試和評(píng)估：A431細(xì)胞用于評(píng)估潛在抗癌藥物候選物的療效和有效性。研究人員通過進(jìn)行多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)來確定藥物對(duì)癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲和凋亡的影響。 由 Nurhidayah Ab. Rahim 及其同事進(jìn)行的研究利用 A431 細(xì)胞并評(píng)估了 2022 年生物合成的 Alstonia angustiloba 植物銀納米顆粒的治療潛力。研究結(jié)果顯示，angustiloba-AgNPs對(duì)皮膚鱗狀癌細(xì)胞具有抗增殖作用[4]。

腫瘤異種移植模型： A431細(xì)胞系具有致瘤性，接種到小鼠模型中時(shí)可形成腫瘤。因此，它是開發(fā)小鼠異種移植模型以研究體內(nèi)癌癥生物學(xué)的有用工具。一些研究使用A431癌細(xì)胞系開發(fā)腫瘤異種移植模型。 如Yu Jin Lim和他的團(tuán)隊(duì)使用A431細(xì)胞開發(fā)了皮膚腫瘤異種移植小鼠模型，以評(píng)估體內(nèi)外源性表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的抗腫瘤和放射增敏作用[5]。

5.A431細(xì)胞：研究文獻(xiàn)
以下是一些以A431皮膚癌細(xì)胞系為特色的重要研究出版物。

生物聚合物PVA-AuNPs和PCL-姜黃素負(fù)載靜電紡絲納米纖維的功效及其對(duì)A431皮膚癌細(xì)胞系的抗癌活性這篇文章于2020年發(fā)表在《Materials Today Communications》雜志上。該研究探討了這種納米纖維對(duì)A431皮膚癌細(xì)胞系的抗癌活性。

真菌Eutypella spp-CrP14分離自長(zhǎng)春花的生物堿長(zhǎng)春花堿引發(fā)A431鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系凋亡這項(xiàng)研究于2016年發(fā)表在《BMC Complementary Medicine and Therapies》雜志上，表明從真菌Eutypella spp-CrP14中分離出的次生代謝物長(zhǎng)春花堿能夠誘導(dǎo)A431細(xì)胞凋亡。

CDC42SE1在A431細(xì)胞中的過表達(dá)通過抑制Akt通路降低了細(xì)胞增殖這項(xiàng)研究于2019年發(fā)表在《Cells》雜志上。這項(xiàng)研究提出CDC42SE1基因是皮膚癌進(jìn)展的重要生物標(biāo)志物，因其下調(diào)有助于腫瘤發(fā)生。

二甲雙胍通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路抑制A431細(xì)胞的增殖這項(xiàng)研究于2015年發(fā)表在《Experimental and Therapeutic Medicine》雜志上。該研究提出，二甲雙胍通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路抑制A431皮膚癌細(xì)胞系的增殖。

6.A431細(xì)胞系的資源：實(shí)驗(yàn)方案、視頻等
有關(guān)A431細(xì)胞的在線資源有限，以下是其中一些。

轉(zhuǎn)染A431細(xì)胞：此鏈接提供了一份指南，介紹了如何轉(zhuǎn)染A431癌細(xì)胞。

以下鏈接包含了A431細(xì)胞的培養(yǎng)信息。
A431癌細(xì)胞系：此鏈接包含了關(guān)于A431細(xì)胞系的必要培養(yǎng)信息。其中包括培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、冷凍保存和增殖培養(yǎng)的處理等內(nèi)容。
A431細(xì)胞的培養(yǎng)：本網(wǎng)站包含了A431細(xì)胞系的簡(jiǎn)要培養(yǎng)方案。

參考文獻(xiàn)

1. Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

2. Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n?butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011. Molecular medicine reports, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

3. Rahaman, A., et al., Eucalyptol targets PI3K/Akt/mTOR pathway to inhibit skin cancer metastasis. Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583.

4. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line). Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814.

5. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells. Cancer Research and Treatment: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.