「青蓮聚焦」蛋白質(zhì)組學(xué)FAQ基礎(chǔ)定義(二)
蛋白質(zhì)組學(xué)(英語(yǔ):proteomics,又譯作蛋白質(zhì)體學(xué)),是以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象,研究細(xì)胞、組織或生物體蛋白質(zhì)組成及其變化規(guī)律的科學(xué)。這個(gè)概念最早是在1994年,由Marc Wikins首先提出的新名詞。
上周分享了基礎(chǔ)定義(一),本周將繼續(xù)分享基礎(chǔ)定義(二)
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6.?HPLC的原理是什么?
答案:色譜法是一種分離技術(shù),試樣混合物的分離過(guò)程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進(jìn)行著的分配過(guò)程。其中的一相固定不動(dòng),稱為固定相;另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的流體(氣體或液體),稱為流動(dòng)相。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。
7.??HPLC主要用途是什么?
答案:高效液相色譜法(HPLC)是目前應(yīng)用廣泛的分離、分析、純化有機(jī)化合物(包括能通過(guò)化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)化合物的無(wú)機(jī)物)的有效方法之一。在已知的有機(jī)化合物中,約有80%能用高效液相色譜法分離、分析,而且此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點(diǎn)、難氣化揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)化合物和生命物質(zhì)。
8.?公司的質(zhì)譜平臺(tái)有哪幾種型號(hào)?區(qū)別是什么?
答案:
1.Q ExactiveTM?組合型四級(jí)桿Orbitrap;
2.Q ExactiveTM?HF組合型四級(jí)桿Orbitrap;
3.Orbitrap FusionTM?TribridTM;
4.Orbitrap?FusionTM?Lumos?TM?TribridTM三合一。
不同的質(zhì)譜儀主要差別在于質(zhì)量范圍和分辨率的不同,三合一和二合一質(zhì)譜,各有各的特點(diǎn),摸索合適的采集方法,都能獲得較好質(zhì)量的數(shù)據(jù)。
9.?MALDI-TOF質(zhì)譜的原理及其使用范圍?
答案:基質(zhì)輔助激光解析串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,?Time of Flight Mass Spectrometer (TOF)?是一種很常用的質(zhì)譜儀。離子經(jīng)過(guò)加速后獲得統(tǒng)一的動(dòng)能,并進(jìn)入無(wú)場(chǎng)漂移管中恒定速度飛行,因此離子質(zhì)量越大,到達(dá)接收器所用時(shí)間越長(zhǎng),離子質(zhì)量越小,到達(dá)接收器所用時(shí)間越短,根據(jù)這一原理,可以通過(guò)檢測(cè)飛行時(shí)間而判斷離子的m/z值。此類質(zhì)譜儀沒(méi)有分析系統(tǒng),適合于較為簡(jiǎn)單的樣本。目前一般適用于:純蛋白分子量測(cè)定、膠點(diǎn)蛋白鑒定。
10.?簡(jiǎn)介高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)
答案:HPLC-MS/MS高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),液相色譜作為分離技術(shù),質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng),分離的肽段進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行離子碎片化;經(jīng)過(guò)質(zhì)譜質(zhì)量分析器檢測(cè)器得到譜圖;譜圖信息經(jīng)過(guò)生物信息統(tǒng)計(jì)分析,得到譜圖的注釋信息,完成對(duì)樣本的定性分析。
液質(zhì)聯(lián)用的優(yōu)勢(shì)即液相對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏性相結(jié)合。
11.?我公司蛋白產(chǎn)品類型?
答案:?jiǎn)我坏鞍阻b定;混合蛋白鑒定;Label-Free組學(xué)分析;TMT/iTRAQ組學(xué)分析;磷酸化蛋白組學(xué)分析;泛素化/甲基化/乙酰化/糖基化蛋白組學(xué)分析;宏蛋白組學(xué)分析;DIA全息掃描;PRM靶向蛋白組學(xué);外泌體蛋白組學(xué)、FFPE、O/N-糖基化。
本周的FAQ就到此結(jié)束啦~
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