一文了解EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒
EpiQuik CUT&RUN?m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒用途:
EpiQuik? 切割和運行m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒旨在富集RNA含有來自低輸入RNA的m6A片段,并通過PCR或圖譜鑒定區(qū)域特異性m6A通過使用Illumina平臺或其他方法進行下一代測序,獲得超轉錄組寬m6A。創(chuàng)新的工作原理、優(yōu)化的協(xié)議和套件組件允許捕獲m6A片段具有最小的非特異性背景水平。富集的RNA是特異性的適用于快速構建非條形碼(單復合)和條形碼(復合)庫,允許m6A區(qū)域以較小的偏差和高分辨率進行映射。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒輸入量:
一般來說,每個反應的總RNA量在1μg到20μg之間。為了獲得最佳制備,輸入量應為10μg RNA,盡管數(shù)據(jù)可以從使用該試劑盒,總RNA含量低至500納克。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒起始材料:
起始材料可以包括各種哺乳動物細胞樣本,如培養(yǎng)物燒瓶或平板上的細胞,從血液、體液和血液中分離的原代細胞或稀有細胞群新鮮/冷凍組織、從整個細胞群和胚胎細胞中分離的特定細胞等。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒抗體:
本試劑盒中使用的抗m6A兔多克隆抗體對m6A具有高度特異性RNA片段,MeRIP級,與腺嘌呤非甲基化RNA片段無交叉反應。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒注意事項:
為避免交叉污染,小心地用移液管將樣品或溶液移到試紙上威爾斯。使用氣溶膠屏障移液管頭,并在液體轉移之間始終更換移液管頭。穿在整個過程中佩戴手套。如果手套與樣品接觸,立即更換手套。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒運輸和儲存;
該套件分兩部分裝運:部分在室溫下裝運,第二部分在室溫下裝運4°C下的冷凍冰袋。拿到后,根據(jù)上表中的溫度將部件存放在避光處。正確儲存后,試劑盒可自裝運之日起穩(wěn)定長達6個月。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒注意:使用前檢查WB(洗滌緩沖液)是否含有鹽沉淀物。如果是這樣的話,在房間里短暫暖和一下加熱或37°C,搖動緩沖液,直到鹽重新溶解。
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒程序:
EpiQuik? 切割和運行m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒包含所需的所有必要試劑用于從總RNA開始進行成功的m6A RNA富集。在反應中,RNA在含有m6A的靶區(qū)的兩端中的序列被切割/移除,并且靶區(qū)使用珠子結合的m6A捕獲抗體將含有m6A的片段拉下。豐富的然后釋放、純化和洗脫RNA。試劑盒中包括非免疫IgG對照品和m6A陽性對照。這些可以用來證明試劑盒的有效性和性能富集RNA定量或生物分析儀步驟。