01 血清中解凍后會(huì)出現(xiàn)些許沉淀

細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會(huì)存在以下種類的沉淀物

纖維蛋白：纖維蛋白是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1-2mm，可以用肉眼觀察到。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的。

纖維蛋白原：一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過程中仍然處于溶解狀態(tài)，而當(dāng)經(jīng)過最后的過濾分 裝后，就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。

磷酸鈣：磷酸鈣也是常見的一種沉淀物，通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37°C培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。

膽固醇、脂肪酸酯和一些不溶性脂蛋白質(zhì)：膽固醇、脂肪酸酯以及一些不溶性脂蛋白質(zhì)。它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因之一。

02 沉淀去除方法建議

通常以上這些沉淀物不會(huì)影響血清的品質(zhì)，如果您希望除去這些沉淀物，可以將血清轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，以400g進(jìn)行離心，離心后將上清液加入預(yù)過濾培養(yǎng)基直接使用即可。我們不建議您以過濾的方法除去這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗鼈兛赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。

03 血清分裝的小技巧

血清分裝要提前準(zhǔn)備好無菌分裝瓶并在無菌環(huán)境下進(jìn)行，因?yàn)檠逶诶鋬龊篌w積會(huì)膨脹，所以需要在分裝前預(yù)留下空間，以免造成血清膨脹導(dǎo)致瓶體破裂從而造成污染。

04 血清中補(bǔ)體對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)的影響

補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì)，存在于人和脊椎動(dòng)物血清及組織液中，不耐熱，可組成龐大的補(bǔ)體系統(tǒng)，可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞過程，刺激平滑肌收縮、細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。

05 不同批次血清顏色為什么有差異？

血清中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過程中細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。國家藥典規(guī)定≤20mg/dL。

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