大鼠的創(chuàng)傷性視神經(jīng)損傷模型你知道有幾種嗎?
視神經(jīng)牽拉傷大鼠模型
造模方法: 對大鼠進(jìn)行全身麻醉后,球結(jié)膜切開1/4,用血管鉗分離至球后,將眼球向外托出至球后與眶前骨緣平齊,立即恢復(fù)眼球正常解剖位置。解剖測量正常球后視神經(jīng)起始段至視交叉長度,以及牽拉球后與眶骨緣平齊時(shí)的視神經(jīng)長度,測得視神經(jīng)延長的長度,而后觀察視神經(jīng)牽拉傷后的視神經(jīng)纖維超微結(jié)構(gòu)的變化。視神經(jīng)牽拉傷大鼠模型的牽拉方向可以分為與視神經(jīng)管平行或與視神經(jīng)管垂直: 前者可造成視神經(jīng)的彌漫性軸索損傷,后者類似視神經(jīng)管骨折所致的切割傷。
優(yōu)缺點(diǎn):用該模型進(jìn)行研究具有較好的臨床意義,可較為準(zhǔn)確地定量損傷程度。但其致傷裝置復(fù)雜、手術(shù)步驟較多,操作過程難度較大,不利于大量開展研究工作。
視神經(jīng)撞擊傷大鼠模型
視神經(jīng)撞擊傷大鼠模型是一種間接致傷模型,利用間接撞擊造成的視神經(jīng)損傷致傷方式非常接近于臨床,也是目前視神經(jīng)損傷研究中應(yīng)用較多的一種。
它分為閉合性和開放性兩大類:
(1)閉合性:用頭盔將動物頭部固定,通過加速沖擊儀撞擊動物頭部造成間接性視神經(jīng)外傷。
(2)開放性:開放性的造模方法:全麻大鼠后,顯露大鼠兩側(cè)眶上緣切跡和眶壁,沿著10:00~2:00弧形剪開雙眼穹隆部結(jié)膜,咬骨鉗向視神經(jīng)管方向咬除部分眶壁骨板,然后沿鞏膜外壁將自制的打擊管經(jīng)結(jié)膜切口伸入眼眶內(nèi)約2mm,與此同時(shí),將大鼠頭部固定在液壓顱腦損傷儀(FPI)鼠架上,致傷頭卡在一側(cè)視神經(jīng)孔上方的眶板上,打擊球從高處自由落下?lián)粲诳^上,根據(jù)打擊錘不同的預(yù)定角度及其所產(chǎn)生的不同打擊力量,將損傷分為輕、重兩組分別對大鼠的視神經(jīng)進(jìn)行撞擊,建立程度不同的視神經(jīng)損傷模型; 結(jié)果顯示損傷后隨著時(shí)間的延長,視網(wǎng)膜各層細(xì)胞逐漸減少,傷后8周在血管和星形膠質(zhì)細(xì)胞突起的附近有呈簇狀分布的新生軸突,數(shù)量上重傷組少于輕傷組; 閃光刺激視覺誘發(fā)電位(F-VEP)與傷前相比,潛伏期延長,振幅降低,損傷越重,傷后變化越明顯。
優(yōu)缺點(diǎn):視神經(jīng)撞擊傷模型十分接近臨床狀態(tài)的間接視神經(jīng)損傷,即致傷力通過顱骨的傳導(dǎo),在伴發(fā)或不伴發(fā)視神經(jīng)管骨折的情況下致視神經(jīng)損傷。此模型在損傷視神經(jīng)的同時(shí)保持了其完整性,傷情穩(wěn)定,重復(fù)性好,對操作者的依賴程度較小,且可大致定量致傷程度。
從其結(jié)果來看,開放性撞擊法相對閉合性撞擊法來說是更為完善的模型制作方法,由于咬除了眶壁,使其撞擊力量更加集中,方向性更好,強(qiáng)度穩(wěn)定、成功率高,是比較接近于臨床狀態(tài)的間接視神經(jīng)損傷,但是手術(shù)復(fù)雜、操作不便、設(shè)備要求高; 而閉合撞擊法與臨床創(chuàng)傷性視神經(jīng)損傷的特點(diǎn)更加符合,但由于成功率低、動物致死率高,不利于術(shù)后繼續(xù)飼養(yǎng)觀察,因而不是理想的模型制作方法。
視神經(jīng)夾持傷大鼠模型
視神經(jīng)夾持傷大鼠模型是在實(shí)驗(yàn)研究上較多采用的方法,最接近臨床上的視神經(jīng)挫傷,主要用于外傷性不完全損傷等類型的研究。
造模方法:用水合氯醛或戊巴比妥將大鼠充分麻醉后,并將其固定于手術(shù)臺上,在雙目手術(shù)顯微鏡下,沿外眥部剪開球結(jié)膜,鈍性分離外直肌,向前牽拉眼球,暴露視神經(jīng),用夾持器械于球后夾持視神經(jīng),并避免損傷眼動脈,形成夾持傷模型,不同模型夾持時(shí)間及夾持力度各有不同。視神經(jīng)鉗夾傷的夾持器械主要包括血管鉗、血管鑷、神經(jīng)損傷夾、動脈瘤夾、珠寶鉗等,夾傷的力量和時(shí)間各有一定差異,且受多種因素影響。
有研究者采用60g力度的微血管鉗在球后2mm處鉗夾視神經(jīng)30s致傷; 有研究者采用夾持力為50g夾持鉗在球后約2mm處鉗夾視神經(jīng) 10s。
造模驗(yàn)證:損傷后出現(xiàn)視神經(jīng)腫脹、視神經(jīng)纖維稀疏水腫、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目漸進(jìn)性減少,并且隨著致傷強(qiáng)度的增加,致傷時(shí)間的延長,損傷呈進(jìn)行性加重。
優(yōu)點(diǎn):視神經(jīng)夾持傷大鼠模型的優(yōu)點(diǎn)為設(shè)計(jì)簡單、易于操作、無需開顱,且創(chuàng)傷較小,具有保持視神經(jīng)鞘膜完整性、損傷明確、術(shù)后動物存活率高等特點(diǎn),與臨床上視神經(jīng)挫傷的特點(diǎn)相符合,因而應(yīng)用更加廣泛。
缺點(diǎn):但是目前對于夾力大小、夾持時(shí)間未形成統(tǒng)一的規(guī)范,而且致傷程度對操作者依賴性較大,不同操作者造成的視神經(jīng)損傷程度難以保持一致,且損傷程度難以精確定量,故缺乏統(tǒng)一的、可控制的致傷標(biāo)準(zhǔn)。
視神經(jīng)橫斷傷大鼠模型
視神經(jīng)橫斷傷大鼠模型是各種視神經(jīng)損傷模型中最易建立,并且最易于統(tǒng)一損傷標(biāo)準(zhǔn)的模型。
造模方法:用水合氯醛或戊巴比妥將大鼠充分麻醉后,并將其固定于手術(shù)臺上,在雙目手術(shù)顯微鏡下,沿外眥部剪開球結(jié)膜暴露鞏膜,鈍性分離外直肌,向前牽拉眼球,暴露視神經(jīng),于球后剪斷,形成動物模型。
優(yōu)缺點(diǎn):此模型具有保證各試驗(yàn)中致傷量一致,具有簡單可行性,便于對照研究等優(yōu)點(diǎn),不足之處在于該模型在隨后的修復(fù)治療研究方面有局限性。