一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

通過(guò)實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)測(cè)定藥物L(fēng)D50的方法、步驟和計(jì)算方法，了解急性毒性試驗(yàn)的常規(guī)方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理?

半數(shù)致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能夠引起試驗(yàn)動(dòng)物一半死亡的藥物劑量，通常用藥物致死劑量的對(duì)數(shù)值表示。LD50及相應(yīng)置信區(qū)間是由劑量-反應(yīng)模型得出的最常用的統(tǒng)計(jì)量。新藥急性毒性試驗(yàn)的LD50測(cè)定是臨床前安全評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容，也是各類藥品(化學(xué)、中藥和生物制品)注冊(cè)時(shí)必需申報(bào)的資料。LD50的測(cè)定方法很多，如：目測(cè)機(jī)率單位法、機(jī)率單位加權(quán)回歸法（Bliss法）、寇氏法（Karber法）及序貫法等，其中Bliss法是目前推薦使用的方法。我國(guó)衛(wèi)生部規(guī)定，Bliss法是作為新藥LD50測(cè)定評(píng)定必須采用的方法。?

三、實(shí)驗(yàn)材料?

1.1.器材：

2.2.試劑：硫酸鎂溶液。

3.3.動(dòng)物：小白鼠。

四、實(shí)驗(yàn)步驟??

1、預(yù)試驗(yàn)? 取小鼠8只，以2只為一組分成4組，選擇組距較大的一系列劑量，分別按組腹腔注硫酸鎂溶液，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，找出引起0%死亡率和100％死亡率劑量的所在范圍（至少應(yīng)找出引起20%～80%死亡率）。（參考劑量：LD100為1.2g/kg, LD 0為 0.7g/kg）。?

2、正式試驗(yàn)? ?在預(yù)初驗(yàn)所獲得的0%和100%致死量的范圍內(nèi)，選用6個(gè)劑量（1.2 g/kg 、1.1g/kg 、1g/kg 、0.9g/kg 、0.8g/kg、0.7g/kg），每組8只小鼠，動(dòng)物的體重和性別要均勻分配，完成動(dòng)物分組和劑量計(jì)算后按腹腔注射給藥。

3、LD50測(cè)定中應(yīng)觀察紀(jì)錄的項(xiàng)目

⑴? 實(shí)驗(yàn)要素：藥物的批號(hào)，動(dòng)物品系，來(lái)源，性別，體重，給藥方式及劑量、給藥時(shí)間等。

⑵ 給藥后各種反應(yīng)：潛伏期，中毒現(xiàn)象，開(kāi)始出現(xiàn)死亡的時(shí)間，死前的現(xiàn)象，各組死亡的只數(shù)等。

?4、結(jié)果計(jì)算? 實(shí)驗(yàn)完畢后，清點(diǎn)各組死亡鼠數(shù)和算出死亡率（P），使用SPSS軟件進(jìn)行機(jī)率單位加權(quán)回歸法(Bliss法)計(jì)算LD50。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論