熒光標記單糖/熒光標記雙糖/熒光標記糖胺聚糖(GAGs)
2022-08-19 15:47 作者:ruixishengwu | 我要投稿
糖胺聚糖(Glycosaminoglycans,GAGs)是一類生物大分子,通過與體內(nèi)各種生長因子.酶及細胞粘附因子等結(jié)合,調(diào)節(jié)多種生物學(xué)過程。關(guān)于GAGs熒光標記,一是通過脫乙酰暴露氨基基團,再加入能與氨基反應(yīng)的熒光試劑實現(xiàn);二是采用還原胺化方法,將其還原端與胺基熒光素偶聯(lián)。
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以1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺為催化劑,將糖胺聚糖(肝素,硫酸乙酰肝素,硫酸軟骨素A,B,C,D,E)中糖醛酸的羧基與氨基熒光素中氨基偶聯(lián),分別得到各熒光標記糖胺聚糖.將標記糖胺聚糖用點樣儀點在硝酸纖維素包被玻璃芯片上,分別探討其在硝酸纖維素薄膜上的保留率及其與硫酸軟骨素抗體(克隆號CS-56)的相互作用.
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結(jié)果表明,各種糖胺聚糖在硝酸纖維素膜中保留率不同,硫酸軟骨素E(51.7%)硫酸軟骨素A(19.5%)硫酸乙酰肝素(16.4%)肝素(14.1%)硫酸軟骨素B(12.3%)硫酸軟骨素D(10.8%)硫酸軟骨素C(10.7%);定量計算得各種糖胺聚糖與CS-56結(jié)合能力:硫酸軟骨素C硫酸軟骨素D硫酸軟骨素A硫酸軟骨素E,硫酸軟骨素B,肝素及硫酸乙酰肝素與CS-56無結(jié)合.

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星戈瑞熒光2022.8
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