艾美捷ViraSafe 慢病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)——更安全的包裝方法
基于人類(lèi)免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒載體已成為一種有前景的載體用于基因轉(zhuǎn)移研究的載體。慢病毒載體的優(yōu)勢(shì)在于基因轉(zhuǎn)移和整合為分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞。囊泡性假型包膜口腔炎病毒包膜G(VSV-G)蛋白拓寬了靶細(xì)胞的范圍。慢病毒載體已被證明可以將基因傳遞給神經(jīng)元、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,這些細(xì)胞類(lèi)型以前不能使用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。慢病毒載體也被證明在轉(zhuǎn)導(dǎo)在體內(nèi)沒(méi)有毒性或免疫反應(yīng)的腦、肝、肌肉和視網(wǎng)膜。最近,慢病毒該系統(tǒng)被廣泛用于在多種細(xì)胞系和原代細(xì)胞中有效整合siRNA在體外和體內(nèi)。
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慢病毒顆粒是由293T細(xì)胞通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒產(chǎn)生的編碼病毒粒子的成分(圖1)。出于對(duì)傳染病的安全考慮HIV-1的性質(zhì),最近的慢病毒包裝系統(tǒng)已經(jīng)將病毒成分分離成3或4種質(zhì)粒。但是,這些系統(tǒng)生成復(fù)制能力的機(jī)會(huì)仍然很小重組后的慢病毒。此外,大多數(shù)商業(yè)慢病毒包裝系統(tǒng)提供在預(yù)混制劑中含有病毒結(jié)構(gòu)蛋白的質(zhì)粒,使其幾乎不可能以優(yōu)化特定實(shí)驗(yàn)和宿主細(xì)胞的各種質(zhì)粒的比例。
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艾美捷ViraSafe?慢病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)#VPK-206提供了一種更安全的包裝方法慢病毒,同時(shí)仍然提供高病毒滴度。此外,每個(gè)質(zhì)粒是單獨(dú)提供的,而不是而不是在包裝混合物中。這使您能夠靈活地?cái)U(kuò)增單個(gè)質(zhì)粒為你的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化質(zhì)粒的比例。
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ViraSafe?慢病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)主要功能:
1.包裝質(zhì)粒:改進(jìn)包裝質(zhì)粒以提高性能并減少矢量分量之間重組的可能性。
a.盡量減少HIV序列——無(wú)輔助蛋白、Tat或Rev或LTR
b.通過(guò)密碼子擺動(dòng)Gag序列防止與載體SM重疊
c.通過(guò)結(jié)合腺病毒VAI元件來(lái)提高顆粒的產(chǎn)生
2.靈活:包括包裝矢量在內(nèi)的所有矢量都是單獨(dú)提供的,以允許最終用戶優(yōu)化載體比例以獲得最大慢病毒產(chǎn)量。
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圖1:293T細(xì)胞中慢病毒的產(chǎn)生
ViraSafe?慢病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)相關(guān)研究:
1. LTV-100: 293LTV Cell Line
2. LTV-200: ViraDuctin??Lentivirus Transduction Kit
3. VPK-107: QuickTiter??Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated HIV p24)
4. VPK-108-H: QuickTiter??Lentivirus Quantitation Kit (HIV p24 ELISA)
5. VPK-205: ViraSafe??Lentivirus Packaging System, Ecotropic
6. VPK-211: pSMPUW Universal Lentiviral Expression Vector (Promoterless)