艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒組分及原理分析
雙鏈RNA (dsRNA)?抗體及ELISA試劑盒常被應(yīng)用于mRNA產(chǎn)品的質(zhì)控環(huán)節(jié)。dsRNA抗體包括J2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J2),J5單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J5),K1單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K1)和K2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K2),其中J2抗體是dsRNA檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。J2抗dsRNA IgG2a單克隆抗體已成為dsRNA檢測的J標(biāo)準(zhǔn)。
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艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒使用的兩種dsRNA抗體如下:
雌性DBA/2小鼠腹腔注射50ug L-dsRNA
和75ug甲基化牛血清白蛋白的混合物,在完全弗氏佐劑中乳化。
在幾次增強后,將脾細(xì)胞與Sp2/0-Agl4骨髓瘤細(xì)胞融合以產(chǎn)生雜交瘤克隆J2和K2。
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艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒包含以下試劑,用于200次測試(2x96孔):
試劑01:1小瓶包衣抗體(儲存于-20℃
試劑A:1小瓶142 bp dsRNA作為陽性對照(儲存于-20℃)
試劑B:1小瓶dsRNA特異性檢測抗體(在RPMI+5%FBS中,儲存在+4℃或最好是-20℃)
試劑C:1小瓶HRP綴合的F(ab’)2山羊抗小鼠二級抗體片段(儲存于+4℃或-20℃)
試劑D:1小瓶TMB底物溶液(儲存于+4℃,避光
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艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒原理:
基于使用兩種雙鏈?RNA (dsRNA)?特異性單克隆抗體,dsRNA?檢測試劑盒可以靈敏和選擇性地檢測?dsRNA?分子(大于?30-40 bp),而不受其核苷酸組成和序列的影響。檢測具有高度特異性:在存在?1.000-10.000?倍過量其他核酸的情況下,可以檢測核酸提取物中的dsRNA。該測定基于雙抗夾心ELISA原理,使用?J2 (IgG2a)?小鼠單克隆抗體作為捕獲抗體,單克隆抗體?K2 (IgM)?用作檢測抗體。
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艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒原理:
基于使用兩種雙鏈?RNA (dsRNA)?特異性單克隆抗體,dsRNA?檢測試劑盒可以靈敏和選擇性地檢測?dsRNA?分子(大于?30-40 bp),而不受其核苷酸組成和序列的影響。檢測具有高度特異性:在存在?1.000-10.000?倍過量其他核酸的情況下,可以檢測核酸提取物中的dsRNA。該測定基于雙抗夾心ELISA原理,使用?J2 (IgG2a)?小鼠單克隆抗體作為捕獲抗體,單克隆抗體?K2 (IgM)?用作檢測抗體。