類器官（organoids）是指一種利用干細(xì)胞、祖細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。2021年，類器官技術(shù)被列為“十四五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)專項(xiàng)[1]，作為疾病模型，相比于傳統(tǒng)2D疾病模型，類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機(jī)理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近，在多領(lǐng)域?qū)l(fā)揮重要，諸如細(xì)胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領(lǐng)域?；|(zhì)膠作為類器官和3D培養(yǎng)的重要載體，在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。

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基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長(zhǎng)因子。在室溫條件下，基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。

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凝膠制備方法

1）基質(zhì)膠融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻基質(zhì)膠。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，然后將培養(yǎng)的細(xì)胞與基質(zhì)膠混合，用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150-200?μL/cm2生長(zhǎng)面積的濃度加入基質(zhì)膠制備3D培養(yǎng)使用的凝膠，詳見表1。

3）在37℃放置30min，此時(shí)即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液。

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3D細(xì)胞及類器官培養(yǎng)過程：

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艾美捷Biogradetech?低生長(zhǎng)因子，基質(zhì)膠（類器官，3D培養(yǎng)）詳情：

中文名稱：低生長(zhǎng)因子，基質(zhì)膠（類器官，3D培養(yǎng)）

英文名字：Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)

貨號(hào)：A-MGL01-10mL

規(guī)格：10mL

形式：標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠4℃溶解后，呈透明流動(dòng)液態(tài)狀態(tài)；高濃度基質(zhì)膠0℃溶解后，呈透明流動(dòng)液態(tài)狀態(tài)，4℃久置呈半凝膠狀

保存建議：≤-20°C

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基質(zhì)膠FAQ：

1、拿到的基質(zhì)有色差的變化（淡黃色到深紅色）是什么原因？

對(duì)于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

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2、基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項(xiàng)？

所有操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

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3、基質(zhì)膠的如何分裝凍存使用？

可將凍融后的基質(zhì)膠分裝在多個(gè)凍存管，凍存管需預(yù)冷，分裝后迅速冷凍并保存，避免多次凍融。