01?高分文獻

最新研究成果

近期，中國食品藥品檢定研究院及國家藥品監(jiān)督管理局的研究人員發(fā)表了關(guān)于抗體熱穩(wěn)定性分析的相關(guān)技術(shù)最新的研究成果，可以為國內(nèi)抗體藥物研發(fā)企業(yè)提供相應的技術(shù)參考。

自從1986年，全球第一款單抗藥物問世之后，經(jīng)過幾十年的發(fā)展，抗體藥物已經(jīng)成為全球制藥領(lǐng)域增長最快的領(lǐng)域之一?？贵w藥物應用領(lǐng)域廣泛，涵蓋腫瘤、自身免疫性疾病、心血管和神經(jīng)性疾病、抗感染、罕見病等領(lǐng)域。我國在2000年批準了首個進口的利妥昔單抗產(chǎn)品之后，我國的抗體藥物產(chǎn)業(yè)也有了迅猛發(fā)展。

抗體活性是其發(fā)揮治療作用最關(guān)鍵的質(zhì)量屬性，其中熱穩(wěn)定性評價是反映高級結(jié)構(gòu)正確與否的重要一環(huán)，同時較高的熱穩(wěn)定性也是抗體藥物成藥性和儲存的保障。

權(quán)威驗證！可替代性技術(shù)優(yōu)勢明顯！

傳統(tǒng)方法使用DSC（差示掃描量熱法）進行表征，但是該方法對于樣本的濃度（0.2~2mg/mL）有一定要求，樣本檢測通量也有限制，不適用于現(xiàn)在的研發(fā)需求。對于成藥的高濃度處方而言，往往需要進行稀釋進行檢測，從而偏離原有樣品的穩(wěn)定性屬性。

基于此，中檢院對nanoDSF技術(shù)平臺與DSC技術(shù)進行了比較，發(fā)現(xiàn)NanoTemper公司的nanoDSF技術(shù)不僅僅具有與DSC的一致性精確數(shù)據(jù)，還彌補了DSC在濃度與檢測通量上的缺陷。

nanoDSF

nanoDSF技術(shù)展示出與DSC平臺一致的精確性，nanoDSF與 DSC一致，均表現(xiàn)出良好的精確性，能夠很好的檢測到蛋白信號，也能精準識別抗體樣品的不同結(jié)構(gòu)。

作者又考察了不同濃度下nanoDSF技術(shù)的重復性，高精準的重復性，完全滿足日常研究和檢測的數(shù)據(jù)間的可比性，不必因為數(shù)據(jù)質(zhì)量的問題而造成不同批次間差異過大，無法進行有效的比較。

02?技術(shù)對比

最新研究成果

那么兩種技術(shù)間數(shù)據(jù)的可比性如何呢？

作者對不同濃度的抗體樣品在兩個平臺下的檢測結(jié)果進行了對比，２種方法的Tm檢測結(jié)果具有較好的相關(guān)性，各檢測濃度下Tm結(jié)果的相關(guān)性均達0.99以上，說明nanoDSF原理檢測Tm具有可行性。

而在不同濃度下檢測抗體樣品也展現(xiàn)出來驚人的一致性，低濃度下也能很精確地檢測出不同的結(jié)構(gòu)域變化，說明nanoDSF技術(shù)具有極好的數(shù)據(jù)質(zhì)量，能夠檢測各種不同濃度下的蛋白樣品。

對于PR系列儀器中的背反射模塊，能夠高精準地檢測聚集的產(chǎn)生。隨著濃度的升高，聚集的傾向也越大，對于蛋白的穩(wěn)定性而言，熱穩(wěn)定性與膠體穩(wěn)定性都是重要的參數(shù)。而濃度也帶來了Tm的差異，所以對原濃度樣品的檢測是十分必要的。PR系列儀器，可以檢測寬泛濃度范圍（5 μg/mL~250 mg/mL）的樣品，僅需10 μL 樣品即可完成檢測。

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最后，文章認為：nanoDSF技術(shù)具有較寬的濃度適用范圍，較少的樣品消耗，較高的檢測通量，較好的特異性、精密度、準確性，可以作為單抗分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、膠體穩(wěn)定性及可比性研究等的有力工具。

PR Panta搭載了功能強大的四個功能模塊（nanoDSF，背反射，DLS與SLS），能夠全方面的評估蛋白樣品的熱穩(wěn)定性與膠體穩(wěn)定性，已經(jīng)被廣泛的應用于各類蛋白穩(wěn)定性研究中。