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IHC免疫組化技術(shù)應(yīng)用

2022-08-26 13:51 作者:Cas9X海星生物 0人讀過 | 我要投稿

免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry，IHC)是臨床病理診斷中常用的技術(shù)和手段。從20世紀(jì)70年代開始，免疫組化技術(shù)就已經(jīng)應(yīng)用于病理診斷，對診斷腫瘤、腫瘤分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響，同時也擴(kuò)展了人們對于各種疾病及腫瘤形成過程的認(rèn)識，提高了病理診斷與研究水平。

1. 什么是免疫組化？
免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來，以此作為抗原或半抗原。然后通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再用此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的，因此還必須借助于組織化學(xué)的方法（熒光素、酶、金屬離子、同位素）將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來，以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究（Figure 1）。

Figure 1. The theoretical diagram of IHC

免疫組化針對的樣本主要是組織。組織是來自患者或動物，經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片，封片后再處理。若樣本是細(xì)胞，通常被稱為免疫細(xì)胞化學(xué)（Immunocytochemistry，ICC）。對于ICC，大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除，只剩下整個細(xì)胞來染色。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液，來自患者或動物（如血涂片、拭子等），或在實驗室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。

2.?免疫組化技術(shù)在臨床上的應(yīng)用?
免疫組化因為其特異性高，敏感性強(qiáng)，方法步驟統(tǒng)一、形態(tài)、功能和代謝結(jié)合密切等方面的優(yōu)勢，使得其成為臨床病理不可或缺的手段。目前免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床主要有以下幾個方面：

（1）腫瘤良惡性的判斷：對于反應(yīng)性增生還是腫瘤性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別。

（2）確定腫瘤分期：腫瘤分期是判斷預(yù)后的一個指標(biāo)，與是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān)，而通過免疫組化方法可以判斷腫瘤是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲。

（3）細(xì)胞屬性的判定：通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分，來判定細(xì)胞的屬性，確定腫瘤的來源。

（4）確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位：對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性腫瘤的組織學(xué)來源，進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道癌、膽管癌、胰腺癌中陽性，而在肺癌、乳腺癌、腎癌中陰性。

（5）對“未分化”惡性腫瘤的分類：未分化惡性腫瘤包括癌或肉瘤，在HE切片上由于腫瘤的“未分化”而缺少腫瘤細(xì)胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。

（6）進(jìn)一步分類不同器官與組織交界處腫瘤：由于重疊的特征，在一些組織器官交界處的腫瘤，僅憑組織學(xué)基礎(chǔ)對腫瘤進(jìn)行分類很困難。如發(fā)生于組織交界處的腫瘤有睪丸胚胎癌與精原細(xì)胞癌，兩者較難區(qū)別，且治療與預(yù)后顯著不同，但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別，角蛋白陰性則為精原細(xì)胞癌，而角蛋白陽性則為胚胎癌。

（7）及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶：在常規(guī)組織切片中，辨別單個或幾個轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞很難，淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些癌的早期轉(zhuǎn)移有時也不易區(qū)別，而采用免疫組化方法，有助于及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小(癌)轉(zhuǎn)移灶。

3.?IHC標(biāo)準(zhǔn)品細(xì)胞株定制服務(wù)
免疫組織化學(xué)的過程質(zhì)控尤為重要。目前的IHC參考品較多來源于人體組織樣本，數(shù)量有限，無法長期穩(wěn)定的用于參考品生產(chǎn)。而來源于腫瘤，存在組織異質(zhì)性，不能很好的確保參考品的均勻性和一致性。海星生物針對現(xiàn)有產(chǎn)品的缺陷，通過高效基因編輯技術(shù)和表達(dá)系統(tǒng)，可以獲得腫瘤標(biāo)志物IHC染色、弱染色、中等染色及強(qiáng)染色的單克隆細(xì)胞系，作為IHC的參考品。