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顯微觀察-圖像質(zhì)量差的原因終于找到了!想一機(jī)多用的先來看看吧

2023-06-14 23:23 作者:JamieChu  | 我要投稿

圖像質(zhì)量差的原因終于找到了!想一機(jī)多用的就先來看看吧。

先放結(jié)論:基本不可能一機(jī)多用,或者說非常的困難,避免踩坑。

再感謝一下Z乎 “微觀獵人” 的文章 “顯微基礎(chǔ)①②③④” 一共4編文章,想玩顯微的都可以先去看看,能少走很多彎路。(不能發(fā)站外鏈接,自行復(fù)制粘貼到瀏覽器吧)

https://zhuanlan.zhihu.com/p/567055155

還有他的B站視頻,介紹了顯微鏡的各種效果,一定要看看,有很多有啟發(fā)性的操作:

顯微鏡各種效果簡(jiǎn)介和簡(jiǎn)易DIY方法:

https://www.bilibili.com/video/BV1gh411n7wn/?spm_id_from=333.999.top_right_bar_window_history.content.click&vd_source=81bb98cfe9a2bdded9ddcfc9e4c2d605


而我,是走了很多彎路后,踩了很多坑,最近才發(fā)現(xiàn)了“微觀獵人”的文章。

之前一直以為,一個(gè)物體放在平面上,然后用超大倍數(shù)的放大鏡來進(jìn)行放大,只要放大倍數(shù)夠高,就能看到很小很小的物體,例如細(xì)胞。只要膽子夠大,可能病毒都能看到呢?哈哈哈哈哈。

為什么我要用一般的直筒工業(yè)顯微鏡?

高端的生物顯微鏡,例如奧林巴斯,價(jià)格非常的高,低端顯微鏡又怕成像質(zhì)量不行,而且生物顯微鏡用途單一,于是我就萌生起了用工業(yè)直筒顯微鏡來看生物細(xì)胞裝片的想法。

我的設(shè)想總結(jié)起來是這樣的:

想法1:看大物件(如電路板):1X的鏡頭 + 同軸光源;

想法2:生物裝片的時(shí)候,就換上RMS轉(zhuǎn)接環(huán) + 5X~50X的物鏡并打開底光源;

想法3:看金相的時(shí)候,就換上RMS轉(zhuǎn)接環(huán) + 5X~50X的物鏡關(guān)閉底光源,打開同軸光;

這樣我是不是就可以一舉多得了,一機(jī)多用,豈不美哉?。?/p>

于是拿出手機(jī)打開某寶,手指一頓操作猛如虎,一個(gè)直筒鏡身、一個(gè)帶微調(diào)的顯微鏡支架、一個(gè)SONY傳感器的攝像機(jī)、一個(gè)平面的底光源,就這樣設(shè)備就買齊了。感覺自己馬上就要進(jìn)入微觀世界了,心情異常興奮。

下面幾張圖就是我采購的裝備:

圖1 - 設(shè)備組裝后的整體外觀
圖2 - 同軸光配件,上面有一層特定波長(zhǎng)的濾膜
圖3 - 1X物鏡
圖4 - 5X物鏡配合同軸光看PCB板
圖5 - PCB板上的金屬焊盤效果
圖6 - 打開底光源看生物裝片
圖7 - RMS轉(zhuǎn)接環(huán)與物鏡

眼看簡(jiǎn)直完美,正胸有成竹之時(shí),結(jié)果大翻車啊......

在低倍數(shù)下,例如5X,10X物鏡下,感覺還是可以看看的,雖然實(shí)際上圖像也是不太好,如下圖:

圖8 - 5X物鏡下的顯示效果
圖9 - 10X物鏡下的顯示效果,雖然不是很銳利,但還能分得清結(jié)構(gòu)

但是!在20X,50X的時(shí)候,就大翻車了?。?!如下圖:

圖10 - 50X物鏡下,根冠外層
圖11 - 50X物鏡下,根冠接近分生區(qū)部分

由上圖可以看出圖像肉得不行,分辨率極低。為此我還排查了鏡頭問題、攝像機(jī)問題、軟件問題,最終無果,直到看到了“微觀獵人”的文章。

我的圖像分辨率為什么這么差?

其實(shí)歸納起來,主要就是焦深問題(玩攝影的一般叫景深)。

這里就涉及到攝影相關(guān)的知識(shí),光圈和焦深的關(guān)系,光圈越小焦深越大,光圈越大焦深越淺,看看下圖,能更好理解:

圖12 - 光圈和焦深的關(guān)系

上圖標(biāo)示的景深實(shí)際就是焦深。景深是鏡頭的光學(xué)特性,景深來自焦深,由于被攝景物離鏡頭遠(yuǎn)近不一,在成相面的聚集點(diǎn)也就有了前后之分有的成實(shí)點(diǎn)有的成為虛點(diǎn)這個(gè)虛點(diǎn)叫彌散圈,若彌散圈的直徑小于人的鑒別能力時(shí),虛點(diǎn)和實(shí)點(diǎn)的距離就叫焦深。和焦深相對(duì)的焦景深,實(shí)驗(yàn)證明,焦距越長(zhǎng)、光圈越大,景深越小。景深顧名思義是景物的深度,是使影象清晰的前后的景物深度。

我們現(xiàn)在看看一般光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu),會(huì)發(fā)現(xiàn)有一比較重要的裝置,叫遮光器,這個(gè)遮光器,其實(shí)就等于了相機(jī)鏡頭內(nèi)的光圈,是可以調(diào)節(jié)的!如下圖:

圖13 - 顯微鏡的一般結(jié)構(gòu)

現(xiàn)在再看看我的直筒顯微鏡,只有一個(gè)平面底光源,沒有這個(gè)最重要的部件“遮光器”(或者叫光圈,光柵調(diào)節(jié)器),這無法調(diào)整這個(gè)光圈的大小啊,相當(dāng)于永遠(yuǎn)是最大光圈,在高倍物鏡下(相當(dāng)于一個(gè)超長(zhǎng)焦微距鏡頭),焦深太淺太淺太淺,細(xì)胞標(biāo)本又是透明的,而且有一定厚度,于是導(dǎo)致了圖像肉糊糊的一片了。

圖14 - 只有底光,沒有光圈調(diào)節(jié)

不過呢,如果縮小光圈進(jìn)光量變少,圖像會(huì)變暗該怎么辦?這時(shí)候可以調(diào)大底光源亮度和修改攝像機(jī)的曝光時(shí)間,只要把攝像機(jī)曝光時(shí)間控制在33ms以下,就能得到比較流暢的視頻,同時(shí)亮度上還可以。

最后總結(jié):

一機(jī)多用的想法,基本可以放棄。大家別浪費(fèi)精力和資金了。希望能幫大家多避開一個(gè)坑。這種直筒顯微鏡,還真的只適合工業(yè)上用,看看大物件,看看金相,做做圖像測(cè)量就很好使,如果用來看生物,高倍鏡下血細(xì)胞都看不清的。

目前的這套設(shè)備也沒法增加光圈調(diào)節(jié)的裝置了,看生物片的質(zhì)量是不OK了,準(zhǔn)備入手一些金屬樣本,拍幾輯金相的文章吧,哈哈,這樣可以讓它繼續(xù)發(fā)光發(fā)熱。

購置這套設(shè)備,導(dǎo)致當(dāng)前的工作資金已耗盡,唯有等幾個(gè)月后回血再購入生物顯微鏡了,有生物顯微鏡再拍攝生物片了。

給大家介紹一款好使的圖像采集軟件 JCameraPro,是真的好用,

下載地址:www.jfirmware.com

最后,如果有人懂行,可以介紹一些質(zhì)量比較好的入門生物顯微鏡嗎?需要3目的。

?先行感謝~

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