“以前的研究表明這些細(xì)胞在幾天之內(nèi)就會(huì)失去功能，而這項(xiàng)研究中的CRISPR編輯細(xì)胞在單次輸注后可以在更長的時(shí)間內(nèi)保留抗腫瘤功能，這一事實(shí)令人鼓舞?！?/p>

根據(jù)賓州大學(xué)Abramson癌癥中心研究人員發(fā)布的最新數(shù)據(jù)，經(jīng)過基因編輯的免疫細(xì)胞可以在癌癥患者接受免疫后的幾個(gè)月內(nèi)持續(xù)存活，茁壯成長，發(fā)揮功能。

研究小組表示，從患者體內(nèi)取出的細(xì)胞帶回實(shí)驗(yàn)室，并經(jīng)過最初改造和注射入體內(nèi)，可以在幾個(gè)月后殺死癌癥。對這些細(xì)胞的進(jìn)一步分析證實(shí)，它們已通過三種特定方式成功進(jìn)行了編輯，這標(biāo)志著有史以來首次批準(zhǔn)人類基因組的多次編輯研究用途。

這一成果公布在Science雜志上，基于去年的一項(xiàng)初步報(bào)告：去年11月，賓州大學(xué)通過CRISPR基因編輯工具對三名晚期癌癥的血細(xì)胞進(jìn)行基因改造，醫(yī)生從患者血液中提取出免疫系統(tǒng)細(xì)胞，對其進(jìn)行基因改造以幫助患者對抗癌癥。這是美國首次嘗試使用CRISPR基因編輯治療癌癥。

前所未有的發(fā)現(xiàn)

文章通訊作者，Abramson癌癥中心所長Richard W.

Vague說，“從參與該臨床試驗(yàn)的前三名患者獲得的數(shù)據(jù)證明了兩個(gè)重要的事情，首先，我們可以在制造過程中成功地進(jìn)行多次精確編輯，從而使它們在細(xì)胞中存活更長的時(shí)間。第二，迄今為止這些細(xì)胞已顯示出持續(xù)的攻擊和殺死腫瘤的能力，這是前所未有的！”

這些發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞和基因治療的最新里程碑，也代表了賓州大學(xué)在這一領(lǐng)域的領(lǐng)先地位——他們曾開發(fā)了包括首個(gè)FDA批準(zhǔn)的針對兒童和成人血液癌癥患者的CAR-T細(xì)胞療法Kymriah.

該試驗(yàn)的患者由賓州大學(xué)血液學(xué)惡性腫瘤部門負(fù)責(zé)人Edward A、細(xì)胞免疫治療中心轉(zhuǎn)化與相關(guān)研究實(shí)驗(yàn)室主任Simon F. Lacey博士（共同通訊作者）復(fù)制治療的。

多次精確編輯

這項(xiàng)研究中的方法與CAR-T細(xì)胞療法密切相關(guān)，在CAR-T細(xì)胞療法中，患者的免疫細(xì)胞經(jīng)過工程改造，用以對抗癌癥，但這些細(xì)胞與原來的細(xì)胞存在一些關(guān)鍵差異。與CAR-T療法一樣，本研究的研究人員從收集患者血液中的T細(xì)胞開始。不過該團(tuán)隊(duì)沒有使用針對蛋白質(zhì)的受體（例如CD19）武裝這些細(xì)胞，而是首先使用CRISPR-Cas9編輯來去除三個(gè)基因。前兩個(gè)編輯刪除了T細(xì)胞的天然受體，因此可以對其進(jìn)行重新編程，讓它表達(dá)合成的T細(xì)胞受體，從而使這些細(xì)胞能夠?qū)ふ也⑾麥缒[瘤。第三次編輯刪除了PD-1，這是一個(gè)自然的檢查點(diǎn)，有時(shí)會(huì)阻止T細(xì)胞執(zhí)行工作。

“對這三名患者的這項(xiàng)新分析已經(jīng)證實(shí)，所制造的細(xì)胞包含所有這三種編輯，為這種方法提供了概念證明。這是首次證實(shí)了CRISPR-Cas9技術(shù)能夠同時(shí)靶向人類多個(gè)基因的能力。 這說明了這項(xiàng)技術(shù)在治療許多以前無法治愈或治愈的疾病方面的潛力?！?/p>

一旦敲除了這三個(gè)基因，就可以使用慢病毒插入癌癥特異性合成T細(xì)胞受體來完成第四次基因修飾，該受體告訴編輯過的T細(xì)胞靶向一種稱為NY-ESO-1的抗原。先前發(fā)表的數(shù)據(jù)顯示，這些細(xì)胞通常存活不到一周，但這項(xiàng)新分析顯示，該研究中使用的編輯后的細(xì)胞持續(xù)存在，最長隨訪時(shí)間為9個(gè)月。

在注入患者體內(nèi)后幾個(gè)月，研究人員抽取了更多血液，并分離了CRISPR編輯的細(xì)胞進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)證明回到實(shí)驗(yàn)室后，這些細(xì)胞仍然能夠殺死腫瘤。

June說：“以前的研究表明這些細(xì)胞在幾天之內(nèi)就會(huì)失去功能，而這項(xiàng)研究中的CRISPR編輯細(xì)胞在單次輸注后可以在更長的時(shí)間內(nèi)保留抗腫瘤功能，這一事實(shí)令人鼓舞?！?/p>

這項(xiàng)研究中使用CRISPR編輯的T細(xì)胞像CAR-T細(xì)胞一樣，自身并不活躍。它們需要一種稱為HLA-A*02：01的分子的協(xié)同作用，該分子僅在部分患者中表達(dá)。這意味著必須提前篩查患者，以確保他們適合該方法。滿足要求的參與者在等待細(xì)胞生產(chǎn)的同時(shí)，還根據(jù)需要接受其他臨床指示的治療。一旦該過程完成，在短暫的化療過程中，所有三名患者在一次輸注中均接受了基因編輯的細(xì)胞。對血液樣本的分析顯示，所有三名參與者均在體內(nèi)產(chǎn)生了由CRISPR編輯的T細(xì)胞，并能茁壯成長。而且沒有顯示與治療有關(guān)的嚴(yán)重不良副作用。

這些新數(shù)據(jù)將為后期研究敞開大門，有助于研究這種方法并將其擴(kuò)展到癌癥以外的更廣泛領(lǐng)域。