散文網(wǎng) » 生活 »日常 » 腦缺血再灌注模型和全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?圖文詳解)

腦缺血再灌注模型和全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?圖文詳解)

2022-06-22 16:47 作者:生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包服務(wù) 0人讀過 | 我要投稿

腦缺血在臨床上具有較高的發(fā)病率和死亡率,嚴(yán)重危害中老年患者健康,尋找有明確療效且作用機(jī)制清晰的預(yù)防和治療腦梗死的藥物是當(dāng)前研究的前沿課題和熱點(diǎn)領(lǐng)域。因此,腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷闹苽湓诳茖W(xué)研究中具有重要意義。

中腦動(dòng)脈栓塞MCAO(middle cerebral artery occlusion )和腦卒中CVA(cerebralvascular accident)在實(shí)驗(yàn)過程中最為常用,下面我分享一下我們實(shí)驗(yàn)室的造模方法。

1? MCAO模型制備

?術(shù)前準(zhǔn)備見左圖,選擇220-250g的SD大鼠,10%水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰臥位,頸部正中剃毛消毒備用(右圖)

腦缺血再灌注模型

剪開頸部皮膚,鈍性分離頸部肌肉,暴露并游離單側(cè)頸動(dòng)脈,穿線備用。

腦缺血再灌注模型

動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉主動(dòng)脈,并結(jié)扎頸外動(dòng)脈。主動(dòng)脈用注射器針頭挑開小口,插入自制線栓到頸內(nèi)動(dòng)脈,大約2.5-3cm。結(jié)扎頸內(nèi)動(dòng)脈,結(jié)扎主動(dòng)脈近心端,松開動(dòng)脈夾。

腦缺血再灌注模型

逐層縫合,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要的缺血時(shí)間進(jìn)行拔栓手術(shù)(再灌注),拔栓時(shí)動(dòng)物要完全麻醉,把出線栓的長度約為0.5cm。

2? CVA模型制備

全腦缺血常用的方法是四動(dòng)脈阻斷法(occlusion of four blood vessels)

SD大鼠,10%水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,俯臥臥位,頸部正中剃毛消毒備用。剝離皮膚和肌肉,暴露第一頸椎橫突翼,找到左右兩側(cè)橫突孔。

全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?/p>

將灼熱的電烙鐵尖頭直接插入翼突孔,電凝雙側(cè)椎動(dòng)脈造成永久性閉塞,避免損傷脊髓和腦干。

全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?/p>

逐層縫合枕部皮膚,并消毒。

全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?/p>

之后,仰臥位消毒備用,游離雙側(cè)頸總動(dòng)脈,留線備用,動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈15-30分鐘,松開動(dòng)脈夾,逐層縫合,手術(shù)完成。

全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?/p>

3? 模型成功的評(píng)判方法

神經(jīng)功能缺損(NDS)評(píng)分

0分:活動(dòng)基本正常,無明顯神經(jīng)病學(xué)癥狀;

1分:左側(cè)前爪無法完全伸展;

2分:爬行時(shí)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈;

3分:行走時(shí)向偏癱側(cè)傾倒;

4分:不能自動(dòng)行走,有意識(shí)障礙

5分:死亡

水迷宮實(shí)驗(yàn)

Morris水迷宮(Morris water maze, MWM)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。(左圖正常,右圖模型)