能定量能定性!IP實驗解析--一文讓你徹底明白免疫沉淀!(抗體-蛋白)
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IP 是利用抗體特異性反應富集純化目的蛋白的一種方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。

1、IP 研究基礎

2、IP原理
① IP 結合原理

IP是利用抗原蛋白質(zhì)和抗體的特異性結合以及細菌蛋白質(zhì)的“protein A/G”特異性的結合到抗體(免疫球蛋白)的Fc片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。
② IP 分離原理

3、IP 實驗流程

4、IP 實驗實施

5、IP 定性結果
①蛋白質(zhì)譜檢測

②蛋白WB檢測

③考馬斯亮藍檢測

④電鏡晶體結構分析

6、IP 定量結果
①WB檢測蛋白表達量

②考馬斯亮藍檢測

7、IP 拓展
①Co-IP

證明兩個蛋白在胞內(nèi)有相互作用,但是這個作用可以是直接相互作用,也可以是形成復合物后的間接相互作用。
②ChIP

即染色質(zhì)免疫沉淀,是一項研究蛋白質(zhì)與DNA相互結合的實驗技術。
③RIP

又稱為RNA-IP,即RNA免疫共沉淀,是研究蛋白質(zhì)與RNA互作結合的經(jīng)典技術方法。