鈦修飾外泌體/負載外泌體金屬基體/聚乙烯醇/海藻酸鈉納米水凝膠包封外泌體的制備
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具體涉及一種鈦修飾雙親性高分子材料及其制備方法和其在制備口腔材料用修飾外泌體中的用途。本發(fā)明鈦修飾雙親性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)是由Ti(III)的DTPA絡(luò)合物和DSPE-PEG2000-NH,經(jīng)偶聯(lián)反應(yīng)制備而成的,本發(fā)明材料的雙親性特點可以將外泌體牢固連接在鈦植體表面,為其發(fā)揮促進種植體成骨分化作用提供了必要的支撐。實驗證實,經(jīng)此高分子材料修飾的外泌體對骨髓干細胞成骨分化具有顯著的促進作用,作為一種新的且行之有效的外泌體修飾方案,本發(fā)明材料具備廣闊的制劑研發(fā)和臨床應(yīng)用前景。
鈦修飾雙親性外泌體的制備方法,包括以下步驟:
(1)Ti(III)的DTPA絡(luò)合物的制備:先將0.01摩爾DTPA溶于10mL NaOH溶液中,NaOH溶液的濃度為3.16×105mol/L,pH為9.5,然后向所得溶液中迅速加入1mL含有0.015摩爾TiCl,的鹽酸溶液,鹽酸溶液的體積百分比濃度為15%,待溶液變藍后,用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH至6,即獲得Ti(III)的DTPA絡(luò)合物溶液;
(2)EDC活化:向上述Ti(III)的DTPA絡(luò)合物溶液中加入50mg的EDC,靜置2小時后,采用pH為7.5的HEPES緩沖液透析8-12小時得到透析內(nèi)液,其中活化產(chǎn)物的分子量為100ODa;
(⑶)偶聯(lián)反應(yīng):向上步所得透析內(nèi)液中加入0.01摩爾DSPE-PEG2000-NH,,靜置8-12小時后得到產(chǎn)物溶液;
(4) 產(chǎn)物處理:上述產(chǎn)物溶液經(jīng)分子量為4000Da的超濾離心柱離心除去未連接分子,濾液凍干后即得到目標產(chǎn)物本發(fā)明鈦修飾雙親性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)。
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RXYWX.2022.5.7