線粒體膜電位熒光探針(JC-1;JC-10)
JC-1(貨號:SS2037FY)
JC-1 是線粒體膜電位熒光探針,主要應(yīng)用于測量線粒體膜電位。熒光 : λex 514 nm, λem 531 nm 甲醇溶液。
圖1.JC-1熒光光譜
使用案例
圖2.培養(yǎng)的人前脂肪細(xì)胞在 5 μM 下加載比例線粒體電位指示劑 JC-1 (T3168) 在 37°C 下 30 分鐘。 在活細(xì)胞中,JC-1在去極化膜電位下以綠色熒光單體形式存在,或在超極化膜電位下以橙色熒光J聚集體形式存在。然后用50nM FCCP(一種原生細(xì)胞)處理細(xì)胞,使線粒體膜去極化。加入解耦器后約10分鐘,將電池照亮488nm,并在515-545nm和575-625nm之間收集發(fā)射。
JC-10(貨號:HCQ000588FY)
JC-10 是 JC-1 的優(yōu)越替代品。與JC-1相比,JC-10 具有更好的水溶性。JC-10 可檢測細(xì)胞、組織以及純化的線粒體膜電位。當(dāng)線粒體膜電位較高的情況下,JC-10 聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以發(fā)出紅色的熒光;當(dāng)線粒體膜電位較低情況下,JC-10 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時(shí) JC-10 作為單體,可以發(fā)出綠色熒光。 JC-10 能夠選擇性地進(jìn)入線粒體,并隨著膜電位的增加可逆地將其顏色從綠色變?yōu)槌壬?。熒?:λex 510 nm, λem 525 nm。
jc-1和jc-10使用對比
圖3.用JC-10?和JC-1在Jurkat細(xì)胞中測量Campothecin誘導(dǎo)的線粒體膜電位變化。用喜樹堿(10μM)處理Jurkat細(xì)胞4小時(shí)后,將JC-1和JC-10染料負(fù)載溶液加入孔中并孵育30?分鐘。使用 NOVOstar 酶標(biāo)儀 (BMG Labtech) 在 Ex/Em = 490/525 nm 和 490/590 nm 下測量 JC-1 和 JC-10? 的 J 聚集體和單體形式的熒光強(qiáng)度。