夾心Elisa和競爭性 Elisa的區(qū)別
什么是夾心 ELISA?
夾心 ELISA 是一種常用于檢測和定量免疫測定中抗原的 ELISA。它是一種酶聯(lián)免疫吸附測定,使用兩種抗體:捕獲抗體和檢測抗體。在這種技術(shù)中,樣品中的抗原在抗體之間結(jié)合。ELISA的目的是檢測樣品中靶抗原的存在。因此,在夾心ELISA的情況下,靶抗原在捕獲抗體和檢測抗體之間結(jié)合。在程序開始時,捕獲抗體已經(jīng)固定在表面上。然而,檢測抗體是定量前的最后一步。夾心ELISA中的兩種抗體結(jié)合到靶抗原上的不同位置。此外,捕獲抗體和靶標(biāo)抗體不干擾彼此的結(jié)合能力非常重要。
圖1.夾心ELISA
夾心ELISA中的步驟包括用捕獲抗體涂覆表面,阻斷表面上未結(jié)合的蛋白質(zhì)結(jié)合側(cè),添加含有靶抗原的樣品,添加檢測抗體標(biāo)記的偶聯(lián)物和檢測。該技術(shù)的優(yōu)點是其高特異性和高靈敏度。然而,其主要缺點是捕獲和檢測抗體之間的相互作用。
什么是競爭性 ELISA?
競爭性 ELISA 是一種常用于檢測和定量免疫測定中抗體的 ELISA。這是一種也稱為抑制ELISA的技術(shù)。在競爭性ELISA中,樣品抗原與參比抗原競爭,與特定數(shù)量的標(biāo)記抗體結(jié)合。
圖2.競爭性 ELISA
將參比抗原預(yù)包被在多孔板的表面上。然后將樣品抗原與添加到孔中的標(biāo)記抗體一起預(yù)孵育。根據(jù)樣品中抗原的量(或多或少),游離抗體可用于結(jié)合參比抗原。較弱的信號表明,當(dāng)樣品中存在較多的抗原時,將檢測到較少的參考抗原。該技術(shù)的優(yōu)點是適用于檢測小抗原,適用于檢測復(fù)雜樣品,高特異性和高靈敏度。然而,它有一些缺點,例如需要為每個ELISA標(biāo)記抗體,這可能導(dǎo)致抗體失活,并且隨著靶抗原的增加而信號降低。
夾心 ELISA和競爭性 ELISA?有什么區(qū)別?
夾心 ELISA 通常用于檢測和定量免疫測定中的抗原,而競爭性 ELISA 通常用于檢測和定量免疫測定中的抗體。因此,這是夾心Elisa和競爭性Elisa之間的關(guān)鍵區(qū)別。此外,夾心ELISA使用兩種抗體,而競爭性ELISA使用兩種抗原。