著床動(dòng)物模型【疾病動(dòng)物模型代做】

（一）在體模型

【造模機(jī)制】哺乳動(dòng)物胚胎著床過(guò)程中,胚胎與子宮之間通過(guò)復(fù)雜的雙向識(shí)別與相互協(xié)調(diào),使胚胎在較短的子宮內(nèi)膜接受期內(nèi)與子宮內(nèi)膜貼附,隨后滋養(yǎng)細(xì)胞侵人內(nèi)膜與母體底蛻膜共同形成胎盤。

【造模方法】實(shí)驗(yàn)大隊(duì)和小鼠。常規(guī)手術(shù)器械一套。麻醉用藥(如戊巴比安鈉)。雌二醇、黃體酮、植物油等。1、假孕模型在研究胚胎著床和黃體退化的研究中,除正常妊娠模蠻外,發(fā)情大鼠或小鼠與結(jié)扎輸精管的雄鼠交配后,雖然沒有胚胎形成,但交配刺敞卻能誘導(dǎo)卵巢和子宮發(fā)生某些類似妊娠的變化。2.延遲著床模型在交配第 4 天向假孕小鼠子宮注人一點(diǎn)植物油,油滴就會(huì)模仿胚胎誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜發(fā)生蛻膜反應(yīng);如果在雄鼠與可育雄鼠交配后切除卵巢,再每天給雌鼠皮下注射黃體酮,胚胎無(wú)法植人子宮壁而是游離在子宮腔中,處于一種休眠狀態(tài),如果此時(shí)給雌鼠注射小劑量雌激素,胚泡就會(huì)迅速在子宮中著床。

【模型特點(diǎn)】此類模型所經(jīng)歷的過(guò)程與正常妊娠大體一致。

【應(yīng)用范圍】適用于對(duì)胚泡著床相關(guān)因子的基礎(chǔ)和功能研究。

【注意事項(xiàng)】雌二醇和黃體酮的保存要分開,雖二醇的濃度是黃體酮的二百萬(wàn)分之一，因配制或注射等操作原因,黃體酮很容易污染雌二醇。

【模型評(píng)價(jià)】體內(nèi)模型發(fā)生在子宮腔內(nèi),不便觀察胚胎與母體子宮內(nèi)膜之間的相互作用。

（二）體外模型

【造模機(jī)制】胚胎著床涉及胚胎與母體,將圍著床胚胎及分離純化的滋養(yǎng)細(xì)胞,在體外條件下與母體成分如子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞,基質(zhì)、蛻膜細(xì)胞,細(xì)胞外基質(zhì),羊膜等共培養(yǎng)。

【造模方法】實(shí)驗(yàn)小鼠。常規(guī)手術(shù)器械一套。顯微鏡、二氧化碳培養(yǎng)箱。麻醉用藥(如戊***鈉)。F12：DMEM(1：1)培養(yǎng)液、胎牛血清、雌二醇、黃體酮等。

1.小鼠胚泡與單層子宮內(nèi)膜細(xì)胞的共培養(yǎng)，該模型中的囊胚僅僅定位黏附在上皮細(xì)胞層上并不能侵入上皮細(xì)胞中,利用該模型僅能進(jìn)行胚胎著床第一階段的研究。

2.胚泡與子宮上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)子宮上皮細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)一個(gè)人工的基底膜分開,胚泡被種植在上皮細(xì)胞層上。光鏡及電鏡觀察到囊胚黏附并侵入到上皮細(xì)胞層中,但是未穿透基底膜到達(dá)基質(zhì)細(xì)胞層。

3.小鼠囊胚與子宮內(nèi)膜的共培養(yǎng)該模型觀察到囊胚的貼附與植人是連續(xù)的,沒有單層模型中所見的滋養(yǎng)細(xì)胞的外延生長(zhǎng)。

【模型特點(diǎn)】胚胎成分與母體成分在體外培養(yǎng)時(shí)能實(shí)現(xiàn)相互黏附以及滋養(yǎng)層細(xì)胞在培養(yǎng)板上的外延生長(zhǎng)。

【應(yīng)用范圍】適用于對(duì)胚泡著床相關(guān)因子的基礎(chǔ)研究。

【注意事項(xiàng)】體外培養(yǎng)條件與在體時(shí)不完全相同,不能完全再現(xiàn)在體時(shí)的形態(tài)、結(jié)構(gòu)功能.

【模型評(píng)價(jià)】雖然胚胎成分與母體成分相黏附及滋養(yǎng)細(xì)胞外延生長(zhǎng),但很少有胚胎或滋養(yǎng)細(xì)胞能真正侵入母體成分。

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