談?wù)凷UMO標(biāo)簽蛋白
SUMO (small ubiquitin-like modifier)標(biāo)簽蛋白是一種小分子泛素樣修飾蛋白,研究發(fā)現(xiàn)SUMO可以作為重組蛋白表達的融合標(biāo)簽和分子伴侶,不但可以進一步提高融合蛋白的表達量,且具有抗蛋白酶水解以及促進靶蛋白正確折疊,提高重組蛋白可溶性等功能。
SUMO蛋白最早于1996年在酵母中發(fā)現(xiàn)其修飾的蛋白,后來發(fā)現(xiàn)從酵母到真核細胞都有泛素化修飾的蛋白。泛素化修飾作為一種很常見的蛋白翻譯后修飾,也是目前一個研究熱點。目前研究發(fā)現(xiàn)真核細胞中有多種SUMO蛋白, SUMO化主要修飾蛋白質(zhì)的賴氨酸殘基,SUMO化修飾是一個動態(tài)可逆的過程,通過修飾解離動態(tài)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)構(gòu)以維持不同的生理功能。
SUMO作為融合標(biāo)簽蛋白的優(yōu)勢
與MBP,GST,GFP,TrX等標(biāo)簽比較具有更大優(yōu)勢:
1. 促進靶蛋白可溶性表達;
2. 作為伴侶蛋白,促進蛋白質(zhì)正確折疊;
3. 對熱和蛋白酶有很強的耐受性;
4. 有配套的特異性蛋白酶可以切除標(biāo)簽,精準(zhǔn)結(jié)構(gòu)性識別,相比較于以來蛋白氨基酸序列的酶切位點具有更好的特異性;
5. 標(biāo)簽的分子量較小,相對于目標(biāo)蛋白占比性較高。
SUMO在蛋白質(zhì)表達中的應(yīng)用
Sumo融合標(biāo)簽被廣泛的應(yīng)用于原核表達系統(tǒng),除了用于常規(guī)蛋白的表達外還用于毒性蛋白,抗菌肽,蛋白二聚體的表達;但是其不能用于真核表達系統(tǒng),原因是真核細胞內(nèi)有SUMO蛋白酶。但是道高一尺,魔高一丈,目前已經(jīng)有公司開發(fā)出既可用于真核又可用于原核系統(tǒng)的SUMO標(biāo)簽,以及配套的蛋白酶。