DNA提取及基本步驟
2022-12-02 10:42 作者:biofount科研試劑 | 我要投稿
什么是DNA提取
DNA提取是DNA的分離和純化過程。 DNA 可以從血液、冷凍組織樣本或石蠟組織塊中分離出來。 DNA 提取的三個步驟是細胞裂解、DNA 分離和沉淀。 在細胞裂解過程中,細胞膜和細胞核膜等細胞膜屏障會破裂,從而暴露 DNA。 下一步是從樣品中去除膜脂。 最后,DNA 的沉淀涉及通過蛋白酶去除 DNA 相關(guān)蛋白和通過 RNase 去除 RNA。

圖 1:DNA 提取步驟
DNA 提取的基本步驟
1. 細胞裂解與細胞裂解緩沖液裂解細胞膜
2. 脂質(zhì)被洗滌劑和表面活性劑分解
3. 通過添加蛋白酶消化蛋白質(zhì)
4. 通過添加 RNase 消化 RNA
5. 通過加入濃鹽然后離心分離細胞碎片、消化蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和 RNA
6. 用冰冷的乙醇或異丙醇乙醇沉淀 DNA。 醋酸鈉的離子強度可用于改善沉淀。 沉淀的 DNA 在最終溶液中呈線狀。

圖 2:提取的 DNA
酚-氯仿萃取也可用于從蛋白質(zhì)中分離 DNA。 在這里,苯酚使樣品中的蛋白質(zhì)變性,DNA 在提取結(jié)束時保留在水相中。 而且,在有機相中,您可以找到變性的蛋白質(zhì)。 另一種提取 DNA 的方法是微柱純化。 在這里,DNA 與柱子的結(jié)合取決于緩沖液的 pH 值和鹽濃度。
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