CFSE 細胞染色
細胞類型：海拉HeLa

細胞增殖示蹤熒光探針(CFSE); CFDA SE
分子式: C29H19NO11，分子量: 557.47

細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)產(chǎn)品簡介：
CFDA SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一種近年來被廣泛應(yīng)用的細胞增殖檢測用熒光探針，也可以用于細胞的熒光示蹤。
常與Pluronic? F-127(MA0061)可以增強其效果
激發(fā)波長：Ex(nm)492nm(熒光FITC濾片檢測);488nm流式激發(fā)光檢測
發(fā)射波長：517nm
細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。

細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 使用方法：
1.CFSE儲存液（5mM）的配制
用1ml DMSO溶解2.79mg CFSE，充分混勻即得到5mM的儲存液（1mg/ml的CFSE溶液濃度相當于其摩爾濃度1.8mM）。
【注意】該儲存液需立即使用，根據(jù)使用量計算如有剩余請務(wù)必分裝后于≤-20℃避光干燥保存，避免反復(fù)凍融。
2.CFSE工作液（0.5-5μM）的配制
使用前用含20mM Hepes的Hanks 緩沖液（HHBS）或其他不含氨基的合適緩沖液（pH=7.0）對上述CFSE 儲存液進行1,000~10,000倍稀釋，并旋渦震蕩混勻。
3.操作方法
活細胞染色的推薦步驟，可根據(jù)實際情況進行適當調(diào)整。
根據(jù)實驗要求，用適當藥物處理細胞；
離心收集細胞，調(diào)整細胞濃度為1-5×105個/管；
用500μl CFSE工作液懸浮細胞，于室溫或37℃避光孵育10-30min；
吸除CFSE 染液，用HHBS或其他合適緩沖液清洗細胞，用500μl預(yù)熱HHBS或培養(yǎng)液懸浮細胞；
在Ex/Em=490/520nm下用流式細胞儀（FL1通道）或熒光顯微鏡觀察細胞。

細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 應(yīng)用領(lǐng)域：?
1.細胞增殖檢測（尤其對淋巴細胞）2.體內(nèi)示蹤 3.細胞熒光標記 4.細胞毒性檢測
保存條件：
儲存條件：-20℃避光保存，2年有效。

細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 注意事項：
熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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